CP912446 戈氏放線菌PCR試劑免費代測
- 公司名稱 上海一研生物科技有限公司
- 品牌 DSMZ
- 型號 CP912446
- 產地 進口/國產
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2019/10/25 11:17:29
- 訪問次數 922
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供貨周期 | 一周 | 規格 | 50T |
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貨號 | CP912446 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅用于科研 |
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區域操作。本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下
產品名稱 | 戈氏放線菌PCR試劑免費代測 |
英文名稱 | Actinomyces gerencseriaePCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產物長度為 494 bp。
3. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
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Q-PCR技術:
實時熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應體系中加入熒光標記物,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,后通過擴增曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實現真正實現了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實現多重反應、自動化程度高、無污染、實時和準確等特點。
熒光定量PCR所使用的熒光基團可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來進行熒光定量PCR時,我們首先在PCR反應體系中加入過量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后發射一定量的熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結合的特點,以及探針內熒光報告基團和淬滅基團的分子特性來實現對PCR進行定量檢測。這種方法可以實現高靈敏度,嚴格針對特定堿基序列的定量實驗。