根據《中國藥典》2020版三部生物制品生產檢定用動物細胞基質制備及質量控制，用于生產抗體類藥物、蛋白類藥物、細胞治療產品等生物制品的細胞系/株，需通過全面的細胞檢定，并經國家藥品監督管理部門批準。義翹神州細胞庫檢測實驗室為生物安全二級實驗室，已在北京市備案，且通過CNAS認證。該實驗室按照GMP和GLP質量體系運行，B+A環境，滿足無菌檢測、分枝桿菌檢測環境要求。

義翹神州擁有經驗豐富的檢測團隊，可全程提供技術指導，并在項目開展之前提供相關咨詢。依據藥典方法及ICH、FDA及其它監管法規，義翹神州可根據客戶的不同申報需求，提供細胞庫檢定方案，以更好地幫助客戶完成中外申報，滿足出海需求。出具的檢測報告獲得監管部門認可，已助力多家公司完成IND和BLA申報。

細胞庫的建立

細胞庫的建立可為生物制品的生產提供檢定合格、質量相同、能持續穩定傳代的細胞。

各級細胞庫的概念

• PCB：由一個原始細胞群體發展成為傳代穩定的細胞群體，或經過克隆培養形成的均一細胞群體，通過檢定證明適用于生物制品生產或檢定。在特定條件下，將一定數量、成分均一的細胞懸液，定量均勻分裝于細胞凍存管，于液氮凍存，即為細胞種子，供建立主細胞庫用。

• WCB：工作細胞庫的細胞由MCB傳代擴增制成。生產企業的工作細胞庫必須限定為一個細胞代次。凍存時細胞的傳代水平須確保細胞復蘇后傳代增殖的細胞數量能滿足生產一批或一個亞批制品。復蘇后的傳代的水平應不超過批準的該細胞用于生產的限定。所制備的WCB必須經檢定合格后，方可用于生產。

• MCB：取細胞種子經細胞傳代、增殖后均勻混合成一批，定量均勻分裝于細胞凍存管，保存于液氮。經全面檢定合格后，即可作為主細胞庫，用于工作細胞庫的制備。生產企業的主細胞庫最多不得超過兩個細胞代次。

• EOPC&UPB：生產終末細胞是指在或超過生產末期時收獲的細胞，盡可能取按生產規模制備的生產末期細胞。EOPC應進行一次全面檢定，當生產工藝發生改變時，應重新對EOPC進行檢測。收獲液UPB包含生產用細胞和細胞培養上清液。

細胞庫檢定的必要性

生物制品的安全性：造成生物制品的污染，直接影響產品的安全性； 污染后給企業帶來巨大的經濟損失。

國內外法規要求：中國、美國、歐洲等藥典明確規定必須對細胞庫進行充分檢定后才可用于生物制品的生產； CDE審查必查項目。

細胞庫檢定階段

原則上各級細胞庫建好庫后要及時進行檢定，確保細胞庫沒有污染后，才能用于下級細胞庫的建立或產品的生產。 細胞庫建立后應至少對MCB細胞及生產終末細胞（EOPC）進行一次全面檢定。當生產工藝發生改變時，應重新對EOPC進行檢定。每次從MCB建立一個新的WCB，均應按規定項目進行檢定。 IND或BLA階段對細胞庫的檢定要求是相同的，但需滿足現行藥典法規的要求。

雙C認證細胞庫檢測服務  

○ 經驗豐富，方法成熟                 ○ 檢測快，通量高，周期短                ○ 支持中外雙報，滿足出海需求

雙C認證細胞庫檢測服務技術平臺

蘇州細胞庫檢測中心

蘇州細胞庫檢測中心是一個專門提供細胞庫檢定服務的檢測中心，占地面積廣，通量大，可以解決更多客戶需求。同時實驗室嚴格遵循GLP和GMP規范進行管理。
• 體系認證：CMA認證、CNAS (申請中)
• 管理：GMP、GLP、CNAS
• 實驗室：生物二級+負壓條件

北京細胞庫檢測中心

擁有專業的細胞庫檢測技術人員，實踐經驗豐富，可根據不同生物制品類別和國內外（如NMPA、FDA、ICH、EMA等）不同的申報要求，制定規范科學和經驗證的細胞庫檢定方案。
• 體系認證：CNAS認證
• 管理：GMP、GLP、CNAS
• 實驗室：生物二級+負壓條件

實驗室和儀器設備

實驗室按照GLP和GMP質量體系運行，B+A環境，符合無菌檢測、分枝桿菌檢測環境要求。并通過生物安全二級實驗室備案，保證生物安全。配套共聚焦顯微鏡、透射電鏡、熒光定量PCR儀等儀器設備。

細胞庫檢測服務范圍

義翹神州可提供主細胞庫（MCB）、工作細胞庫（WCB）、收獲液 (UPB)、生產終末細胞（EOPC）的細胞庫檢定服務，已成功檢測多個CHO、293、間充質干細胞等細胞庫項目。細胞庫檢測方法成熟，符合藥典等法規的要求，且經過嚴格的方法學驗證。

細胞庫檢測服務內容

義翹神州遵循NMPA、FDA、EMA、ICH等多個國內外法規和指導原則，建立了全面的細胞庫檢定方法，主要包括以下幾個方面：細胞鑒別、無菌檢查、支原體檢查、內外源病毒污染檢查、成瘤性檢查等，義翹神州提供的檢測項目和方法描述見下表：

備注："+" 為必檢項目，"-" 為非強制檢定項目。(+) 表示需要根據細胞特性、傳代歷史、培養過程等情況要求的檢定項目。

細胞庫檢定方法

• 細菌、真菌檢查
  無菌檢查
  按照2020版《中國藥典》三部通則1101無菌檢查法的要求進行，義翹神州可提供薄膜過濾法和直接接種法。無菌檢查在B+A環境中進行，并且在檢測過程中對環境進行持續監測。下圖是采用薄膜過濾法的案例。

• 支原體檢查——培養法
  按照2020版《中國藥典》中生物制品生產檢定用動物細胞基質制備及質量控制及通則3301支原體檢查法的要求進行，義翹神州提供符合法規要求的支原體檢查（培養法）。培養法檢測的靈敏度高于中國藥典要求，肺炎支原體達到10-9，口腔支原體達到10-5。

• 支原體檢查——DNA染色法
  按照2020版《中國藥典》中生物制品生產檢定用動物細胞基質制備及質量控制及通則3301支原體檢查法的要求進行，義翹神州提供符合法規要求的指示細胞培養法（DNA 染色法）。如果樣品被支原體污染，在熒光顯微鏡下除細胞外，可見大小不等、不規則的熒光著色顆粒。

• 內外源病毒污染檢查——體外不同指示細胞接種培養
  按照2020版《中國藥典》中生物制品生產檢定用動物細胞基質制備及質量控制的要求進行，根據樣品需求提供周期為14或28天（人或猴巨細胞病毒，CMV）的檢測。將供試品接種至3種指示細胞（Vero、MRC-5、同種屬同組織類型來源細胞），連續培養14天或28天，觀察細胞病變，并采用血吸附和血凝集檢測是否存在任何病毒污染。

• 內外源病毒污染檢查——牛源病毒檢查
  按照2020版《中國藥典》中生物制品生產檢定用動物細胞基質制備及質量控制及通則3604新生牛血清檢測要求的要求進行。通過接種指示細胞培養21天，分別進行細胞病變觀察（CPE）、血吸附檢查（HAd）及熒光抗體檢測（IF）。牛源性病毒檢查按照中國藥典要求，提供完整的陽性對照和陰性對照。

• 內外源病毒污染檢查——豬源病毒檢查
  按照2020版《中國藥典》中生物制品生產檢定用動物細胞基質制備及質量控制的要求進行，通過接種指示細胞PK-15培養21天后進行細胞病變觀察（CPE）、血吸附檢查（HAd）。

• 內外源病毒污染檢查——動物和雞胚體內接種法
  按照2020版《中國藥典》中生物制品生產檢定用動物細胞基質制備及質量控制及通則3302外源病毒因子檢查法的要求進行，義翹神州提供乳鼠腦內及腹腔接種法、小鼠腦內及腹腔接種法、豚鼠腹腔接種法、家兔皮內及皮下接種法、雞胚接種法。