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ELISA新方法酶循環法(enzymatic cycling)ELISA

時間:2009/8/7閱讀:234
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ELISA新方法酶循環法(enzymatic cycling)ELISA

 

    此法是Serf1985年建立。在反應系統中,AP并不直接催化底物顯色,而是使底物NADP+(輔酶脫磷酸,生成NAD+(輔酶1)NAD+活化第二酶系統——醇脫氫酶和黃遞酶(diaphoras)催化的氧化還原循環(redoxcy cycle)NAD+還原為NADH,乙醇被氧化成乙醛。

 

    NADH還原四氮唑鹽生成深藍色的可溶性甲譖max492nm)。此反應系統具有較強的放大效應,對AP信號的放大比一般KLISA至少強250倍。

 

    Johannsson等將上述反應系統引入雙抗體夾心ELISA法,用于檢測促甲狀腺激素(TSH),敏感性可達pUL,即每孔(100rtl)28X104TSH分子。

 

    Seth等研究認為,此種新型ELISA在敏感性、特異性、測定速度及簡便程度等諸方面均優于放射免疫測定。反應的zui終產物甲臘的zui大吸收波長(492nm)又在現有酶標儀的讀數范圍,檢測時無需增添新設備。

 

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