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抗眼肌抗體EMAb的檢測方法

時間:2009/8/8閱讀:311
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抗眼肌抗體EMAb的檢測方法

 

    抗眼肌抗體(eyemuscleantilodyEMAb)為一類能與眼肌細胞膜及可溶性抗原結合的自身抗體。楊清萍等(1998)在提取牛眼肌膜抗原的基礎上,建立了檢測EMAb的免疫印跡(WB)法,對自身免疫性甲狀腺疾病及SLE患者進行了檢測?,F介紹WB法檢測EMAB。

 

    1.操作步驟  將所提取的眼肌膜抗原多肽轉印于硝酸纖維膜(NC膜,孔徑03um)上,將NC膜置5%脫脂奶粉溶液內封閉過夜;含03Tween 20,pH74PBS洗滌;干后切條,4~C保存備用。作WB法時,將抗原膜條置反應槽中,加01mL兔血清,含03Tween 20,pH74001moLLPBS 09mL和待測血清20~zL,37~C孵育45min,洗滌,每槽加辣根過氧化物酶標記的兔抗人IgC lmL37~C孵育45min,洗滌,加DAB底物液lmL,37~C20rain,加2molLH2S0405mL終止反應2min后,流水沖洗,讀取結果。

 

    2.臨床意義  有突眼征和無突眼征的Graves病患者血清中EMAb檢出率較高,但抗體陽性亦見于部分無甲狀腺功能異常的突眼征患者,橋本甲狀腺炎,SLE等患者中。SLE患者血清中存在的EMAb與自身免疫性甲狀腺疾病患者的EMAb有所不同,主要針對42kD35kD多肽,這種異質性抗體與抗核抗體無關,不能被ENA吸收,其存在意義尚不清楚,可能是SLE患者自身免疫反應的一種表現。

 

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