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北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)

米粉中維生素D2、D3的檢測

時間:2013-5-20 閱讀:4045
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    維生素D(vitaminD)為固醇類衍生物,具抗佝僂病作用,又稱抗佝僂病維生素。維生素D家族成員中zui重要的成員是D2和D3。雖然日常膳食可補充部分維生素D,但仍有相當一部分人面臨著維生素D攝入不足的問題,各種人為添加維生素D的食品便應運而生。因此,準確測定各種食品中的維生素D含量顯得非常重要,科研工作者也一直在努力尋找合適的測定方法來得到準確、重現性好的結果。

    迪馬科技應用實驗室采用ProElutVDC維生素D2、D3固相萃取柱進行前處理凈化,DiamonsilC18(2)液相色譜柱成功實現米粉中維生素D2、D3的分離、測定,具有分析結果準確,重現性好的特點。

    樣品準備

    (1)取1g樣品,加入10mL水,充分混勻;

    (2)加入1mL二甲基亞砜、5mL甲醇和20mL正己烷:甲基叔丁基醚=1:2,渦旋混合2min,6000rpm離心2min,收集上清液;

    (3)向下層殘渣中依次加入1mL二甲基亞砜、5mL甲醇和10mL正己烷:甲基叔丁基醚=1:2,重復提取兩次,合并三次提取上清液;

    (4)將上清液在40℃下減壓蒸至近干,待凈化。

    SPE柱凈化——ProElutVDC2g/12mL(Cat.#:65358)

(1)活化: 依次向柱中加入10 mL乙酸乙酯、10 mL正己烷,棄去流出液;
(2)上樣: 再用5 mL正己烷分兩次洗滌旋蒸瓶并加入柱中,棄去流出液;
(3)淋洗: 依次向柱中加入10mL正己烷、10 mL10%乙酸乙酯正己烷,棄去流出液;
(4)洗脫: 向柱中加入20 mL 10%乙酸乙酯正己烷,收集流出液;
(5)重新溶解: 將洗脫液在40 ℃減壓蒸至近干,用甲醇定容至1 mL,供HPLC分析。

    分析條件

色譜柱: Diamonsil C18(2),250mm×4.6mm,5μm(Cat# 99603)
流 速: 1.0 mL/min
檢測器: UV 264 nm
柱 溫: 30 ℃
進樣量: 20 μL
流動相: 甲醇

    添加回收結果

    米粉中維生素D2、D3(添加水平2.0mg/kg)的添加回收結果

目標化合物 維生素D2 維生素D3
回收率(%) 84.69 87.42

    維生素D2、D3標準溶液色譜圖(2.0mg/L)

    米粉中維生素D2、D3(添加水平2.0mg/kg)色譜圖

    米粉中維生素D2、D3(空白)色譜圖

    米粉中維生素D2、D3的檢測相關產品信息:

貨號 名稱 規格
樣品前處理
65358 維生素D2、D3檢測柱 2 g/12 mL,20/pk
ProElut VDC
244358 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 12位
4806 考克(控制流量) 15/pk
99011 真空/正壓兩用泵,無油 1/pk
99013 抽濾瓶套裝 1/pk
(包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞)
37177 針頭式過濾器 Nylon 13 mm,0.22μm 100/pk
37180 針頭式過濾器 Nylon 13 mm,0.45μm 100/pk
色譜柱及保護柱
99603 通用型反相液相色譜柱 250×4.6 mm,5μm
Diamonsil C18(2)
6201 EasyGuard保護柱套裝 1個柱套+2個柱芯
10 × 4.0 mm
標準品
12-N-V17-100MG 維生素D2[50-14-6] 100 mg
12- N-11463-100MG 維生素D3[67-97-0] 100 mg
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑
50102 甲醇HPLC級 4 L
50104 乙酸乙酯HPLC級 4 L
50115 正己烷HPLC級 4 L
50119 二甲基亞砜HPLC級 4 L
50123 甲基叔丁基醚HPLC級 4 L
通用色譜產品
52401B 瓶架/藍色 50 孔
52401A 瓶架/白色 50孔
5323 樣品瓶(棕色/螺紋) 2 mL,100/pk
5325 樣品瓶蓋/含墊(已經組裝) 100/pk
H80465 HPLC 進樣針 25 μL

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