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豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

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參考價(jià)7750
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) A01X2283 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
組織來(lái)源 骨髓 種屬來(lái)源
生長(zhǎng)特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
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詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

一、細(xì)胞基本屬性

細(xì)胞名稱

豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

組織來(lái)源

骨髓

商品貨號(hào)

A01X2283

種屬來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介

豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%-0.1%,含量極低。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過程中,受貼壁時(shí)間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。

包被條件


培養(yǎng)基

FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率

2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性

貼壁

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

傳代特性

可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液

0.25%胰蛋bai酶

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

 

原代細(xì)胞培養(yǎng):

原代細(xì)胞(Primary cells):是指直接從機(jī)體取出的組織或細(xì)胞獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。

原代細(xì)胞培養(yǎng):由于原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,繁殖一定的代數(shù)停止生長(zhǎng)(一般10代以內(nèi))。所以一般認(rèn)為:培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。

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具體步驟:

1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無(wú)菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;

2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;

3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);

4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定,約1-2h;

5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;

6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

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注意事項(xiàng):

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通。

 


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