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Overview
在移液操作中，要獲得可靠的結(jié)果，防止污染至關(guān)重要。需要辨識出潛在的污染機(jī)制，以便制定針對性的解決方案。

氣溶膠，是指懸浮在氣體中的固體或液體顆粒，通常產(chǎn)生于許多實(shí)驗(yàn)室活動中，例如使用空氣正壓式原理的移液器進(jìn)行移液時(shí)，而氣溶膠是移液操作中的重要污染來源。在使用非過濾式的移液器吸頭時(shí)，氣溶膠可能轉(zhuǎn)移至移液器內(nèi)部，繼而導(dǎo)致后續(xù)的樣本受到污染。輕緩小心的移液操作有助于減少氣溶膠的形成。

本文將討論產(chǎn)生于移液操作的三種污染類型：
- 移液器對樣本的污染
- 樣本對移液器的污染
- 樣本對樣本的污染

文末，還有10個(gè)避免移液污染的小貼士，為你的移液工作排除憂患。

1. 移液器對樣本的污染

當(dāng)受污染的移液器或移液器吸頭污染樣本時(shí)，就會造成這種類型的污染。

大多數(shù)制造商生產(chǎn)的移液器吸頭有多種純度級別。純度可分為三個(gè)級別:

- 無純度證明
- 有證明不含 DNA 酶、RNA 酶和內(nèi)毒素等污染物
- 經(jīng)過滅菌，不含微生物

DNA酶、RNA酶和內(nèi)毒素等污染物難以通過任何滅菌法去除，因此，在制造期間防止污染非常重要。需要單獨(dú)檢測是否含有這些污染物，通常由第三方實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。制造后滅菌可確保吸頭在交付給客戶時(shí)不含任何微生物（細(xì)菌、病毒等）。

移液器吸頭還可以是浸出物（源自材料或工藝設(shè)備，會污染樣本的痕量化學(xué)品）的潛在來源。潛在浸出物包括重金屬、紫外穩(wěn)定劑、抗氧劑、色素、脫模劑、生物殺菌劑和表面活性劑等。高品質(zhì)的吸頭是由純聚丙烯，在高質(zhì)量的生產(chǎn)設(shè)備中制造而成，且不含浸出物。建議您與吸頭制造商確認(rèn)這一點(diǎn)。

在日常的實(shí)驗(yàn)室工作中，通過以下這些簡單的準(zhǔn)則可避免移液器至樣本的污染：

- 針對應(yīng)用選擇相關(guān)純度級別的吸頭。
- 使用（預(yù)滅菌的）濾芯吸頭或正壓置換式吸頭。
- 對于某些制造商生產(chǎn)的移液器，可使用安全圓錐過濾器。過濾器可防止氣溶膠進(jìn)入移液器內(nèi)部并污染后續(xù)的樣本。
- 在每個(gè)樣本操作后，務(wù)必更換移液器吸頭。
- 定期對可能接觸樣本的移液器或組件進(jìn)行高壓滅菌或消毒。

 

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2. 樣本對移液器的污染
當(dāng)被轉(zhuǎn)移的液體或來自被轉(zhuǎn)移液體的氣溶膠顆粒進(jìn)入移液器內(nèi)部時(shí)，即發(fā)生這種類型的污染。為將樣本對移液器的污染風(fēng)險(xiǎn)降低，建議采取以下預(yù)防措施：

- 松開移液器按鈕時(shí)務(wù)必要緩慢，以防止移液器吸頭內(nèi)有氣溶膠形成和不受控的液體飛濺。
- 在移液期間保持移液器垂直，并將移液器垂直存放。這能防止液體流進(jìn)移液器內(nèi)部。
- 使用濾芯吸頭或正壓置換式吸頭，以防止氣溶膠從樣本進(jìn)入移液器內(nèi)部。或者，可以在移液器吸頭上使用安全圓錐過濾器。

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3. 樣本對樣本的污染
當(dāng)來自某個(gè)樣本的氣溶膠或液體殘留被帶到下一樣本時(shí)，即發(fā)生樣本對樣本的污染（也叫殘留污染）。例如，當(dāng)同一移液器吸頭被多次使用時(shí)，即發(fā)生這種污染。為避免殘留污染：

- 使用濾芯吸頭或正壓置換式吸頭，以防止氣溶膠從樣本進(jìn)入移液器內(nèi)部，再進(jìn)入下一樣本。或者，可以移液器洗頭上使用安全圓錐過濾器。
- 在每個(gè)樣本操作后，務(wù)必更換移液器吸頭。
- 如果懷疑移液器受到污染，請按制造商的說明對移液器進(jìn)行高壓滅菌或消毒。

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定義

去污
任何通過降低微生物負(fù)荷以防止污染的活動。包括各種滅菌、消毒和殺菌方法。

滅菌
滅活所有微生物，包括細(xì)菌內(nèi)生孢子。可通過使用蒸汽、加熱、化學(xué)品或輻射來實(shí)現(xiàn)。

高壓滅菌
對實(shí)驗(yàn)室來說，高壓滅菌（濕熱）是一種有效的滅菌法。例如：使用高溫高壓的飽和蒸汽來滅活微生物，以及對實(shí)驗(yàn)室塑料和玻璃器皿等的去污處理。曝露時(shí)間和溫度至關(guān)重要。此外，蒸汽需要穿透整個(gè)微生物負(fù)荷方可有效地凈化。

消毒
清除病原性微生物（不包括細(xì)菌內(nèi)生孢子）并將微生物污染降低至可接受的水平。這是一種用于表面凈化的實(shí)用方法。應(yīng)根據(jù)設(shè)想的污染類型選擇消毒劑（如：醇類、酚類化合物、鹵素）、濃度和曝露時(shí)間。

殺菌
對活組織應(yīng)用抗微生物化學(xué)品以消除微生物。

DNA酶
一類強(qiáng)大的酶(核酸酶)，可通過將 DNA 水解成短片段來降解它。在 DNA 純化期間，即使是痕量的 DNA 酶，也可導(dǎo)致 PCR 等DNA技術(shù)產(chǎn)物產(chǎn)率低、無產(chǎn)物或產(chǎn)物降解。污染源：與人接觸、唾液、細(xì)菌。

RNA酶
一類強(qiáng)大的酶(核酸酶),可催化 RNA 降 解成短的片段。這類酶非常穩(wěn)定，難以去除。污染源：皮膚油脂、毛發(fā)、眼淚、細(xì)菌。

內(nèi)毒素
脂多糖（一種大分子）是大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏桿菌、假單胞菌和嗜血桿菌等革蘭氏陰性菌外膜的組成部分。可造成人發(fā)燒并損害細(xì)胞培養(yǎng)物的生長。當(dāng)細(xì)菌死亡和細(xì)胞壁被破壞時(shí)，它會被釋放到環(huán)境中。污染源：內(nèi)毒素存在于細(xì)菌能生長的任何地方，如：空氣，水，土壤，皮膚，原材料，任何非無菌環(huán)境等。

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《避免移液污染的10個(gè)注意事項(xiàng)》