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Fluo-3的保存和溶解:
1) 收到貨后,應置于-20℃保存。
2) 推薦用DMSO溶解探針,溶解前應將DMSO 和Fluo3均在室溫平衡。溶解過程較慢,請保持足夠的溶解時間。如果要長期保存,請用無水DMSO溶解,溶解后的儲液密封置于-20℃保存。同樣儲液在每次開蓋前都要置于室溫平衡,以避免水汽凝結在長期保存中,造成探針水解。一般推薦的儲液濃度為1-5mM,工作液濃度一般為:1-5 μM。為了防止出現較高背景及非特異性染色,探針的終濃度要盡可能低。
3)公司在每次發貨時,都給客戶提供免費的F-127助溶劑,用于探針溶解。 如果用純的DMSO長時間溶解不了,請配制20%的F127 DMSO溶液,加速溶解。
Fluo-3和Fura-2的區別:
Fluo-3和Fura-2相比,其優點是:一方面可以被氬離子激光(argon-ion laser)的488nm激發光激發,便于檢測;另一方面,Fluo-3和鈣離子結合后熒光變化更強,即對鈣離子濃度變化的檢測更加靈敏;同時,Fluo-3和鈣離子的結合能力較弱,這樣可以比Fura-2檢測到細胞內更高濃度的鈣離子水平;此外,對于細胞內的鈣離子的即時變化反應得更加準確,減小了因為和鈣離子解離速度慢而導致的熒光變化滯后。Fluo-3廣泛地用于流式細胞術和激光共聚焦顯微掃描中。