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目錄:上海一研生物科技有限公司>>細胞分析>>細胞凋亡>> Caspase-1 活性分析試劑盒(比色法)

Caspase-1 活性分析試劑盒(比色法)
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更新時間:2024-11-26 15:37:52瀏覽次數:767評價

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供貨周期 現貨 規格 20T/50T/100T
貨號 EY-01X8534 應用領域 化工,生物產業
主要用途 僅供科研研究實驗
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商品屬性:

產品名稱

Caspase-1 活性分析試劑盒(比色法)

英文名稱

Caspase-1 Assay   Kit (Colorimetric)

規格

20T/50T/100T

貨號

EY-01X8534

運輸條件

藍冰運輸

用途

僅供科研研究實驗

背景:

Caspase全稱為含的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase)caspase是一類蛋白酶家族,成員較多,在人類,已經鑒定了11種不同的caspase,根據其蛋白酶序列的同源性可分為3個亞族:Caspase-1亞族包括 Caspase-14511Caspase-2亞族包括Caspase-29 Caspase-3亞族包括Caspase-367810。起細胞凋亡執行者作用的是caspase3,6,7

 

Caspase-1 活性分析試劑盒(比色法)

標記:

1.將細胞培養基與EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU標記培養基。

2.提前將2×EdU標記培養基預熱,然后將150微升2×EdU標記培養基與等體積細胞培養基混合,獲得1×EdU溶液。

【注】:①不建議替換全部培養基,這樣可能會影響細胞增殖的速度。②配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜。

3.孵育細胞2 h,棄培養基。

【注】:①培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態。②大多數腫瘤細胞以及粘附細胞系均可采用2 h的孵育時間。

4.以1xPBS清洗細胞兩次,每次5 min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。

【注】:對于貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。

Caspase-1 活性分析試劑盒(比色法)

實驗步驟:

1. 將細胞以 104-105 個細胞/孔的密度接種在 96 孔板 中,加入 100μL 培養基,含或不含待測化合物。在 CO2 培養箱中在 37℃ 下培養細胞 24 小時。

2. 向板中加入 10μL 不同濃度的待測物質。

3. 在培養箱中將培養板培養適當時間(如 6、12、24 或 48 小時)。

4. 向板的每個孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要將氣泡引入孔中。

5. 將平板在培養箱中孵育 1-4 小時。

6. 在讀板之前,在定軌振蕩器上輕輕混勻。

7. 使用酶標儀測量 450nm 處的吸光度。

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