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D283 Med 人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

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95-D細(xì)胞，人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)血小板基因倉鼠卵巢細(xì)胞,CHO-pt細(xì)胞 CM-M018小鼠頜下腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 小鼠Ⅲ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅢ)ELISA試劑盒 SYNPR/Synaptoporin： 突觸囊泡蛋白抗體 IL2RG Others Mouse 小鼠 IL2RG / CD132 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞-HDMEC 小鼠Ⅲ型膠原(COL3)ELISA試劑盒 Syntaxin 13： 神經(jīng)突觸素13抗體 HCT116/L 人結(jié)腸癌耐耐藥株

Gibco 17001-074 TM-C100 Basal Medium,liquid 450ml 小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒 Syntaxin 1A(brain)： 突觸融合蛋白1抗體 CL-0035BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Sf-21(昆蟲細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA 試劑盒 Syntaxin 6： 突觸融合蛋白6抗體 14. 心臟細(xì)胞系統(tǒng)

Rhesus antibody Rh DVL2 蓬亂蛋白2抗體 EPD3 Others Human 人 EPD3 / PDase3 / CD39L3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠1(IGF-1)ELISA試劑盒 ADV IgG III 腺病毒 IgG Ⅲ型(間接法二步法)

MIG7： 富含半胱酸蛋白質(zhì)MIG7抗體 T24, 人膀胱癌細(xì)胞 胚癌細(xì)胞,Pcc4細(xì)胞 NCI-H1299(人肺癌細(xì)胞)

TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大鼠1(IGF1)ELISA試劑盒 ADV IgM III 腺病毒 IgM Ⅲ型(間接法二步法)

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D283 Med 人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞PTH Others Human 人 PTH / PTH1 / Parathyroid Hormone 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原 0.5mg

H5N1 Hemagglutinin： A型流感病毒H5N1凝集素抗體 CL-0336FC33(人胚胎腎細(xì)胞(Asp-2基因修飾))5×106cells/瓶×2

SP20細(xì)胞，人骨肉瘤細(xì)胞 圓弧青霉 人肺成纖維細(xì)胞;HFL1 人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA 試劑盒 TGF beta 2 Propeptide 轉(zhuǎn)移生長因子–β2前體肽 0.5mg

H1N1++H3N2 nucleocapsid protein： A型流感病毒核衣殼蛋白抗體 HA Others H1N2 甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0911 人膠原凝集素(Collectin)ELISA 試劑盒 TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3) 轉(zhuǎn)移生長因子–β3(抗原) 0.5mg