目錄:合肥恩派爾貿易有限公司>>Abnbio感受態細胞>>表達 感受態細胞>> ABG709-50R5421 酵母感受態細胞
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50X100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | ABG709-50 | 應用領域 | 環保,食品/農產品,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 感受態細胞 |
基因型
MATα ura3-52 leu2 trk1Δhis3Δ200 his4-15trk2Δ1::pCK64
簡單說明：
1、R5421釀酒酵母菌株為K+/鉀離子缺陷型菌株，在文獻中也稱為CY162，MATα型，多用于K+/鉀離子轉運蛋白的鑒定試驗中，也可用于K+/鉀離子通道或鈉鉀離子泵的鑒定試驗。Transformation marker為：ura3，leu2，該菌株可以在含有100mM KCl的培養基中正常生長，在含有5-10mMKCl的培養基中生長緩慢，當培養基中KCl濃度低于0.5mM，R5421（CY162）細胞停止生長。R5421感受態細胞經特殊工藝制作，pGADT7質粒檢測轉化效率>104 cfu/μg DNA。
操作說明
1、取一支無菌的1.5ml EP管，依次加入預冷的目的質粒1-3µg，Carrier DNA 10µl(95-100 度5min 快速冰浴，重復一次)，100µl冰上融化的感受態細胞，PEG/LiAc 500µl，輕輕翻轉混勻6-8次；
2. 30℃水浴30min，每10min輕輕翻轉混勻6-8次；
3. 每支加入20µl的二甲基亞砜；（用于提高轉化效率,可不做）4. 42℃水浴15min，每5min輕輕翻轉混勻6-8次；5. 12000rpm瞬時離心棄上清，每支加入1ml的YPDPlus于30℃復蘇1h；（用于提高轉化效率，可不做）6. 12000rpm瞬時離心棄上清，用100µl 0.9%NaCl重懸，涂板，30℃培養48-96h。
注意事項
1、感受態細胞最好在冰上融化。
2. PEG溶液在低溫環境下會析出，請于常溫下溶解后使用。
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