化工儀器網
技術文章
阿留申病病毒PCR檢測試劑盒操作流程
閱讀：215 發布時間：2021-3-3阿留申病病毒PCR檢測試劑盒操作流程：
1. 根據要保存的各樣本的體積，計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應當是組織體積的10倍（如100mg組織約用1ml RNAwait）；離心收集2×106細胞RNAwait的用量是1ml。
2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中；
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀，立即*浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過厚則RNAwait不能有效滲入，組織中間部位的RNA不能受到保護。較小的組織（如大鼠的腎臟、脾臟，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存時先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過夜（4℃過夜是必需的，這樣可使RNAwait*滲入到組織中），然后轉移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃時仍為液態，有結晶析出，是正常情況）；或者在4℃冰箱過夜后，從RNAwait中取出組織塊，轉移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的標本，反復凍融至室溫20次不影響RNA的質量。
阿留申病病毒PCR檢測試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶操作步驟