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貂源性成分核酸檢測試劑盒48T0.1PCR管

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更新時間:2022-04-12 22:13:59瀏覽次數:271

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 48T 0.1PCR管
貨號 FS-02R6423 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供科研    
貂源性成分核酸檢測試劑盒48T0.1PCR管正在出售的產品:蛋白上樣緩沖液(非還原,5×)規格:10ml
蛋白示蹤上樣緩沖液(還原,5×)規格:5ml
蛋白示蹤上樣緩沖液(非還原,5×)規格:5ml

詳細介紹

特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!

產品名稱

規格

貨號

貂源性成分核酸檢測試劑盒48T0.1PCR管

48T  0.1PCR管

FS-02R6423

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

QQ截圖20201022162313.png 

實驗外包:

1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒。

三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。

11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

BMPs ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白Multi-class antibodies: 48T

 TNFAIP1 壞死因子α誘導蛋白1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh GLTPD2 糖脂轉移蛋白結構域2抗體  0.2ml

NT-proBNP ELISA KIT 大鼠N端前腦鈉 96T

Noxa Noxa蛋白抗體 0.2ml

AQP1 通道蛋白1抗體 0.2ml

 TNFAIP1 壞死因子α誘導蛋白1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

LN(Human Laminin) ELISA KIT 人層連蛋白/板層Multi-class antibodies: 48T

 IFITM1/CD225 干擾誘導跨膜蛋白1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MAP3K7IP3 NFKB激活蛋白1抗體  0.1ml

UPP1(Human uridine phosphorylase 1) ELISA Kit 人尿嘧啶核苷磷化1 96T

Ret 原癌基因酪蛋白激受體RET/多發性腺瘤和甲狀腺髓樣癌蛋白抗體 0.1ml

CPSA(C2F9) 復合前列腺特異性抗原單克隆抗體 0.2ml

 IFITM1/CD225 干擾誘導跨膜蛋白1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rabbit  Guinea pig IgG/Cy7 Cy7標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml

GGTLC2 γ-谷酰轉移輕鏈2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh AGER 晚期糖基化終末產物特異性受體抗體  0.1ml

 Leptin receptor/FITC 熒光標記瘦受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Goat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗羊IgG  0.1ml

 SSTR5/FITC 熒光標記生長抑受體5(SSTR5)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
貂源性成分核酸檢測試劑盒48T0.1PCR管G補綴FHA域血管生成因子1(AGGF1)elisa檢測試劑盒

豬生長因子受體結合蛋白7(Grb7)elisa檢測試劑盒

豬嗜粒趨化因子(ECF/CCL11)elisa檢測試劑盒

豬泛連接E3A (UBE3A)elisa檢測試劑盒

C-Myc結合蛋白(MYCBP)elisa檢測試劑盒

猴促血管生成1(ANG1)elisa檢測試劑盒

猴血管內皮抑抗體(ES-Ab)elisa檢測試劑盒

豬端粒逆轉錄(TERT)elisa檢測試劑盒

豬尾型同源盒轉錄因子(CDX2)elisa檢測試劑盒

豬生長誘導跨膜蛋白(GHITM)elisa檢測試劑盒

豬微管蛋白α3C(TUBα3C)elisa檢測試劑盒

豬腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)elisa檢測試劑盒

豬肌球蛋白重鏈9(MYH9)elisa檢測試劑盒

α-黑色(αMSH)elisa檢測試劑盒

豬磷化外信號調節(pERK)elisa檢測試劑盒


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