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產品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1 | >100次 | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒是一種以JC-1為熒光探針，快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒，可以用于早期的細胞凋亡檢測。 JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時，JC-1聚集在線粒體的基質(matrix)中，形成聚合物(J-aggregates)，可以產生紅色熒光；在線粒體膜電位較低時，JC-1不能聚集在線粒體的基質中，此時JC-1為單體(monomer)，可以產生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。 線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降，同時也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。 |
JC-1單體的最大激發波長為514nm，最大發射波長為529nm；JC-1聚合物(J-aggregates)的最大激發波長為585nm，最大發射波長為590nm。實際觀察時，使用常規的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。
本試劑盒提供了CCCP作為誘導線粒體膜電位下降的陽性對照。對于六孔板中的樣品，本試劑盒共可以檢測100個樣品；對于12孔中的樣品，本試劑盒共可以檢測200個樣品。
試劑盒組分：
JC-1(200X)——————100μl/管，共5管
超純水————————90ml
JC-1染色緩沖液(5X)——80ml
CCCP(10mM)——————20μl
儲存條件：-20℃。
培養操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
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線粒體膜電位檢測試劑盒植酸
其他 肌醇六磷酸；環己六醇磷酸酯；肌醇六磷酸酯；環已六醇六磷酸酯
英文名稱： Phytic acid
其他英文名稱： Cyclohexanehexyl hexapho sphate；Inositol hexaphosphoric acid；Alkalovert
產品規格： BR，70%
包裝：100毫升
CAS號：83-86-3
C6H18O24P6=660.04
級別：BR
含量：≥70.0%
無機磷：合格
鈣：≤0.02%
性狀：淺黃色或淺褐色粘稠液體。呈強酸性。受熱分解。能與水、95％乙醇和甘油混溶，溶于水、乙醇的混合液，極微溶于無水乙醇和甲醇，幾乎不溶于無水苯和。其10％水溶液的pH為0.86。相對密度1.58。小致死量(兔，靜脈)45mg/kg。
用途：生化研究。絡合劑。除去微量重金屬離子。營養劑。肌醇的基料。硬水處理。抑銹劑。有機合成。
保存：RT
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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