詳細介紹
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
參數規(guī)格:
產品名稱:創(chuàng)傷弧菌核酸檢測試劑盒48T 0.1PCR管
產品貨號:FS-02R6344
產品規(guī)格:48T 0.1PCR管
產品分類:PCR-熒光探針法/PCR法
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
Phospho-MK6 (Ser202)/FITC 熒光標記磷化原活化蛋白激MKK6抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
TRAF3/CD40bp /FITC 熒光標記CD40結合蛋白/CD40受體相關因子1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABHD3 肺α/β解蛋白3抗體 0.2ml
Rabbit Avidin/AP 性磷(AP)標記的兔抗親和 0.1ml
GRB10 生長因子受體結合蛋白10抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh RAB8 ras癌基因家族Rab8蛋白抗體(原癌基因c MEL) 0.1ml
TRAF3/CD40bp /FITC 熒光標記CD40結合蛋白/CD40受體相關因子1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Human Amylin ELISA Kit 人胰淀Multi-class antibodies: 48T
Iba1 離子鈣接頭蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAPK organizer 1/Morg1 原活化蛋白激組織蛋白1抗體 0.1ml
WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit 人色酰tRNA合成 96T
RIP3 受體結合絲蘇激3抗體 0.2ml
phospho-Caldesmon (Ser789) 磷化鈣介質抗體 0.1ml
Iba1 離子鈣接頭蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit dog IgG/Gold 膠體金標記的兔抗狗IgG 0.5ml
Cancer/testis antigen family 4 member 7 /抗原家族4亞型7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADCK4 ADCK4蛋白抗體 0.2ml
Lysozyme/FITC 熒光標記溶菌抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgG/FITC FITC標記的兔抗雞IgG 0.3ml
phospho-Tau protein (Ser396)/FITC 熒光標記磷化微管相關蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
創(chuàng)傷弧菌核酸檢測試劑盒48T 0.1PCR管通用型總番茄斑萎病毒(Total Tospo Virus;TOSPO)基因檢測試劑盒 20次大鼠生長釋放多肽elisa檢測試劑盒
通用型南瓜黃化花葉病毒(Zucchini Yellow Mosaic Virus;ZYMV)20次大鼠抗內皮抗體elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒大鼠白介23elisa檢測試劑盒
通用型瓜類性果斑病(西瓜果斑)(Acidovorax avenae subsp. citrulli;Watermelon Fruit Blotch)基因檢測試劑盒20次大鼠骨橋elisa檢測試劑盒
通用型胡蘿卜性葉斑病(Xanthomonas campestris pv. Carotae;Xccar)基因檢測試劑盒20次大鼠周期D3elisa檢測試劑盒
通用型野油菜黃單胞菌(Xanthomonas campestris pv. Pelargonii;Xcp)20次大鼠甲狀旁腺elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒大鼠血管生長elisa檢測試劑盒
通用型加拿大低菜籽油黑脛病/油菜腐爛病/甘藍黑莖病菌(Blackleg of Canola/Leptosphaeria maculans/Phoma lingam)基因檢測試劑盒20次大鼠血紅氧合2elisa檢測試劑盒
通用型疫病菌種(Phytophthora species)基因檢測試劑盒20次大鼠前列腺E1elisa檢測試劑盒
通用型絲核菌種(Rhizoctonia species)基因檢測試劑盒20次小鼠活化蛋白Celisa檢測試劑盒
通用型腐霉屬種(Pythium species)基因檢測試劑盒20次大鼠色Celisa檢測試劑盒
通用型灰斑病灰梨孢菌(Grey Leaf Spot Pyricularia grisea)20次小鼠骨形成蛋白elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒小鼠胰島elisa檢測試劑盒
通用型蘇云金桿菌(Bacillus thuringiensis)基因檢測試劑盒20次小鼠磷化蛋白Celisa檢測試劑盒
通用型籽瓜性果斑病(Acidovorax avenae subsp.citrulli;Aac)20次小鼠同型半胱elisa檢測試劑盒