人類風濕關節炎滑膜成纖維細胞公司正在出售的產品：小鼠胎盤滋養層干細胞大鼠輸尿管平滑肌細胞兔外根鞘細胞羊肺微血管內皮細胞兔脈絡膜微血管內皮細胞人頸動脈平滑肌細胞小鼠滑膜成纖維細胞NE 兔子中性粒細胞彈性蛋白ELISA檢測試劑盒PF-4/CXCL4 兔子血小板因子4ELISA檢測試劑盒8-epi-PGF2α 兔8-異構前列腺ELISA檢測試劑盒hs-CRP 兔超敏C反應蛋白ELISA檢測試劑盒uPA

組織來源：患類風濕性關節炎病人的關節滑膜組織

種屬來源：人

細胞簡介：滑膜是關節囊的內層，淡紅色，  平滑閃光，薄而柔潤，由疏松結締組織組成。關  節腔內的所有結構，  除關節軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關節腔的肌腱、韌 帶等均全部為滑膜所包裹?；し置诨?，在關節活動中起重要作用。正常滑膜  分為兩層，  即薄的細胞層(內腔層)和血管層(內膜下層)，是血管豐富的關節囊內膜 ，貼附于非關節面部分，  覆蓋于關節囊內的骨面上，不在軟骨面上，此部分稱為  邊緣區或“裸區"。滑膜呈粉紅色，  光滑發亮、濕而潤滑，有時可見絨毛，  內含  膠原性纖維?；ぜ毎蠥、  B兩型。巨噬細胞樣A型細胞，表面有絲狀偽足、漿  膜內陷、囊泡、線粒體、溶酶體、胞漿纖維和高爾基體，  具有吞噬功能；  B型成纖 維樣滑膜細胞(FLS) ，有高濃度的內質網結構，  是介導 RA 關節破壞的主要細胞。

培養基：原代成纖維細胞培養體系

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁培養

細胞形態：成纖維樣細胞

傳代特性：細胞特性確定傳代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養條件：氣相：  空氣，95%；CO2 ，5%
一、細胞基本屬性

二、細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片

三、使用方法

人類風濕關節炎滑膜成纖維細胞是一種貼壁培養細胞，細胞形態呈成纖維樣細胞，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化；

3)經1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內；

4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

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四、注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。