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詳細介紹
產品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Caspase 8 Activity Assay Kit | 20次|100次 | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒是采用分光光度法檢測細胞或組織裂解液中caspase 8酶活性或純化的caspase 8酶活性的試劑盒。本試劑盒用酶標儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測時，除標準曲線外可以檢測20個樣品。 Caspase是一個在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 8也稱FLICE、MACH或Mch5，有時被寫作caspase-8或caspase 8，通常以酶原的形式存在，在細胞凋亡的信號轉導過程中被激活。Caspase 8被認為是細胞凋亡信號轉導過程中比較上游的一個caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介導的細胞凋亡過程中caspase 8被激活，形成一個由p18和p10組成的二聚體，進一步激活下游的caspase 4，caspase 6，caspase 9和caspase 10。 |
本Caspase 8活性檢測試劑盒是基于caspase 8可以催化底物Ac-IETD-pNA(acetyl-Ile-Glu-Thr-Aspp-nitroanilide)產生黃色的pNA(p-nitroaniline)，從而可以通過測定吸光度來檢測Caspase 8的活性。pNA在405nm附近有強吸收。
試劑盒中提供了caspase 8催化產生的黃色產物pNA，可以作為定量caspase 8酶活性的標準品。
試劑盒組分：
裂解液——————8ml
檢測緩沖液——————8ml
Ac-IETD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl
儲存條件：-20℃。
培養操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
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色素上皮衍生因子(PEDF)elisa試劑盒英文名稱：PEDF ELISA Kit載脂蛋白H抗體包裝2g
錨蛋白重復結構域蛋白20A1抗體糖化血紅蛋白(HbA1C)AT7519 HCl is a multi-CDK inhibitor for CDK1, 2, 4, 6 and 9 with IC50 of 10-210
Caspase 8 活性檢測試劑盒植物凝膠
其他 冷結樹酯；結冷膠；吡喃葡萄糖醛酸與6-脫氧-L-吡喃甘露糖和D-吡喃葡萄糖乙酸酯的聚合物鈣鉀鈉鹽
英文名稱： Phytagel
其他英文名稱： Agar substitute gelling agent；Gellan Gum
產品規格： 植物細胞培養級
包 裝： 100克/500克
CAS號：71010-52-1
級別：Plant cell culture tested
Congealing Temperature：27～32℃
Transmittance：≥80 %
性狀：粉末，溶于水，溶解度：10mg/ml。植物組織培養基中工作濃度為1.5-2.5 g/L，微生物培養基中工作濃度為10 g/L。植物凝膠需要陽離子(特別是二價陽離子)存在才能使膠凝固。一般植物培養基中的鈣離子和鎂離子的濃度足以讓phytagel凝固。微生物學研究所用的低鹽培養基中為了使Phytagel凝固，通常需要另外加入鈣鹽、鎂鹽或高濃度的Phytagel
用途：生化研究。膠凝劑。Phytagel是從假單胞菌分泌而來的一種瓊脂的替代物，是葡萄糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖的混合物，具有無色、透亮和高韌性的特點，是配制植物組織培養基和微生物培養基的主要成分。由于其克服了傳統瓊脂在植物組織培養中的固有缺陷為植物學研究帶來了一場新的革命，已經成為了的植物組培產品。
保存：RT
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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