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elisa試劑盒要開發新的小分子RNA的提取方法
閱讀:269 發布時間:2020-1-3多數傳統RNA分離試劑盒目的是為回收mRNA 而設計的,往往會棄去較小的RNA分子以減少干擾提高mRNA得率。因此這些步驟會導致一些小分子RNAs,如微小RNAs的損失。另外,此類方法往往涉及酚/lv仿等有毒化學物質的抽提。多數RNA純化試劑盒采用的標準玻璃纖維濾膜或者硅膠濾膜,不能有效的回收更小的小分子RNA,如微小RNA。
elisa試劑盒由于微小RNA存在的廣泛性和多樣性,提示微小RNA可能有非常廣泛多樣的生物功能。盡管對微小RNA的研究還處于初級階段,據推測微小RNA在高級真核生物體內對基因表達的調控作用可能和轉錄因子一樣重要并可能代表在一個新發現的層次上的基因表達調控方式。對一部分微小RNA的研究分析提示微小RNA參與生命過程中一系列的重要進程,包括早期發育,細胞增殖,細胞凋亡,細胞死亡,脂肪代謝和細胞分化以及和癌癥的發生發展密切相關??梢?,對小分子RNA的研究日益受到重視。然而,進行小分子RNA分析的第yi個關鍵步驟就是從生物樣本中純化小分子RNAs。
微小RNA的分子量相對較小,對于常規的核酸提取法都不適用。微小RNA只有在乙醇濃度很高的條件下(大于70% )才能與核酸提取柱相結合,從而得到分離。但在該濃度的乙醇條件下,絕大多數的其他分子,特別是大分子都會被沉淀,使分離無法進行。 目前多采用利用毒性很強的酚以及lv仿等有機試劑,首先將大分子沉淀除掉,然后純化總的核酸。除了使用的試劑有毒外,大分子的DNA和RNA仍然會影響對微小RNA的進一步分析。因此,有必要開發新的小分子RNA的提取方法。
elisa試劑盒由于小分子RNA可能參與分化、發育、組織生長、脂肪代謝等生理過程,在不同的組織和發育階段的表達水平有所不同,進一步了解小分子RNA的生物功能具有重要意義。
微小RNA(microRNA,簡稱miRNA)是生物體內源長度約為20-23個核苷酸的非編碼單鏈小分子RNA,通過與靶mRNA的互補配對而在轉錄后水平上對基因的表達進行負調控, 導致mRNA的降解或翻譯抑制。