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國(guó)際參考。準(zhǔn)備

第一屆 WHO HIV-1 CRF 國(guó)際參考制劑

NIBSC 13/214

建議用下列方法恢復(fù)培養(yǎng)冷凍干燥保藏的菌種。
1、安瓶管開(kāi)封
用浸過(guò)70％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。
用火焰將安瓿管頂端加熱。
滴無(wú)菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開(kāi)裂。
用挫刀或鑷子敲下已開(kāi)裂的安瓿管的頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)
用無(wú)菌吸管，吸取0.3-0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴人安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍于菌體溶解呈懸浮狀
取0.1-0.2ml菌體懸浮液，移植于適宜的瓊脂斜面/平板培養(yǎng)基上，剩余的菌液，注入適宜的液體培養(yǎng)基內(nèi)，然后在建議的溫度下培養(yǎng)。

3、注意事項(xiàng)
菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6一10℃的環(huán)境下。
厭氧菌的培養(yǎng)，如無(wú)特別說(shuō)明，自開(kāi)封至接種完成，均需以無(wú)氧氣體充填，以保持厭氧狀態(tài)。
某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng),此時(shí)請(qǐng)將步驟二重復(fù)一次。