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ELISA檢測試驗雙抗體夾心法和競爭法比較
閱讀：738 發布時間：2024-12-17酶聯免疫吸附試驗（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法。它是應用最多的一種免疫酶技術。ELISA試劑盒（ELISAKits）已成為藥物和植物病理學研究中的常用診斷工具，是檢測組織提取液、血清和細胞培養液中目標抗體/抗原的理想工具，也是重要的質量控制手段。
ELISA檢測試驗雙抗體夾心法和競爭法有以下幾個方面的比較：
原理:
雙抗體夾心法：利用兩種針對抗原不同表位的特異性抗體，一種包被在固相載體上捕獲抗原，另一種用酶標記用于檢測被捕獲的抗原，形成“固相抗體 - 抗原 - 酶標抗體"復合物。
競爭 ELISA 法：分為直接競爭法和間接競爭法。直接競爭法是將酶標記的抗原和待檢測的未標記抗原競爭結合固相抗體；間接競爭法是將未標記抗原和固相抗原競爭結合待檢測的抗體，然后用酶標二抗檢測結合的抗體。
檢測對象:
雙抗體夾心法：主要用于檢測大分子抗原。
競爭 ELISA 法：直接競爭法適合檢測小分子半抗原，間接競爭法適合檢測抗體。
標準曲線:
雙抗體夾心法：標準曲線通常為“S"型，隨著抗原濃度增加，吸光度值上升。
競爭 ELISA 法：標準曲線通常為“反 S"型，隨著待測物濃度增加，吸光度值下降。
靈敏度:
雙抗體夾心法：靈敏度較高，尤其對于含量較低的抗原。
競爭 ELISA 法：直接競爭法對小分子檢測的靈敏度較高。
特異性:
雙抗體夾心法：特異性較高，需要兩種抗體與抗原的特異性結合。
競爭 ELISA 法：特異性相對略低，尤其在競爭不全的情況下。
操作復雜性:
雙抗體夾心法：步驟相對較多，操作較復雜。·
競爭 ELISA 法：操作相對簡單。
應用場景:
雙抗體夾心法：常用于生物醫學中蛋白質、細胞因子等大分子物質的檢測。
競爭 ELISA 法：常用于藥物殘留、激素等小分子物質的檢測。