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小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒實驗使用說明書

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  以下是關(guān)于小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理:

  BS-2220  小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法ELISA技術(shù)。將抗Aβ1-42抗體預包被于微孔板,加入樣本和標準品后,與HRP標記的檢測抗體形成復合物,經(jīng)TMB顯色后通過酶標儀測定OD值,顏色深淺與Aβ1-42濃度呈正相關(guān)?12。

  二、試劑盒組成

  ?主要組分?:

  預包被微孔板(96T/48T)

  標準品(濃度通常為160-400pg/mL)?24HRP標記檢測抗體?3TMB顯色液及終止液?15濃縮洗滌液(需稀釋使用)?38?保存條件?:

  未開封試劑盒:2-8℃保存,有效期6個月?14開封后:建議分裝凍存于-20℃(避免反復凍融)?46三、樣本處理

  ?血清/血漿?:

  采集后需離心(1000×g,10-30分鐘),分離上清?14避免溶血或脂血樣本?45?組織勻漿/細胞上清?:

  離心去除沉淀后取上清檢測?46四、操作步驟

  ?標準品稀釋?:按說明書梯度稀釋(通常為2-90pg/mL范圍)?25?加樣與孵育?:

  每孔加入樣本或標準品100μL,37℃孵育1-2小時?13?洗滌?:使用稀釋后的洗滌液洗板3-5次?38?顯色與終止?:

  加入TMB顯色10-15分鐘,終止液終止反應(yīng)?15?檢測?:

  450nm波長讀取OD值,繪制標準曲線計算濃度?25五、注意事項

  ?質(zhì)量控制?:

  板內(nèi)/板間變異系數(shù)應(yīng)<10%?5回收率建議在84-101%范圍內(nèi)?5?操作規(guī)范?:

  避免使用金屬頭移液器接觸底物?3不同批號試劑不可混用?36六、結(jié)果判讀

  典型標準曲線范圍:15.62-1000pg/mL,檢測限通常<31.25pg/mL?57。建議每次實驗獨立建立標準曲線?5。

  如需具體品牌試劑盒的完整說明書,可提供供應(yīng)商名稱進一步查詢。

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