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倒平板的小技巧

閱讀:1467        發布時間:2022-01-13
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    施啟樂(廣州)儀器有限公司

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     在生物實驗中經常需要倒平板,初學者往往倒不好,導致后繼實驗出現問題。今天,小施總結幾點倒平板小技巧供大家參考。

培養基傾注溫度

1、培養基傾注適宜溫度約45℃。如果手心接觸裝培養基的三角瓶不燙,手背接觸燙,此時的溫度在45度左右,適合倒平板。培養基傾注時溫度太高的話,凝固時間較長,另外皿蓋上會有大量冷凝水,不利于后續實驗。溫度太低,則容易出現倒板過程中瓶中培養基部分凝固的現象。如果要連續倒多個皿,尤其是在冬天,非常容易凝固,一旦凝固則需要再加熱到較高溫度才能溶化。所以建議此時開個50度的恒溫水浴,隨時可把裝培養基的三角瓶放進去加熱,效果會更好。

2、有些培養基需要加入添加成分,這些添加成分在加入前應先放置到室溫,避免冷的液體造成瓊脂凝結或形成片狀物。

3、目前多數實驗室培養基滅菌后會放置水浴或者烘箱中,需使用的時候拿出來直接倒板。但培養基靜置時間不宜過長,靜置時間一般不超過4小時。靜置時間過長,培養基中瓊脂可能會少量凝固,形成類似絮狀析出。

培養皿中有冷凝水

培養皿中有冷凝水,如果只有幾滴,則影響不大,如果過多則需要引起注意。

1、倒皿前將平皿最好保持在35℃-40℃的溫度(觸手有溫熱感)。

2、當需要表面接種時,有冷凝水的平板表面容易產生蔓延菌落。這時可放在有對流的無菌凈化臺中吹干培養基表面,但不能過度干燥,否則培養過程中平板容易開裂。 
3、如果是進行傾注平板計數,則可在凝固后的瓊脂表面再覆蓋一薄層瓊脂培養基即可。

平板傾注量

一般平板傾注量在18-20mL左右,如果培養時間超過48小時或者是培養溫度高于40℃,為防止水分過量蒸發導致平板開裂,傾注量一般是25mL左右。傾注平皿時左三圈、右三圈的輕輕晃動,注意避讓平皿蓋。

平板氣泡

倒板過程中容易出現氣泡,特別是像BS瓊脂這類需要搖勻后倒板的培養基。氣泡過多的話會影響結果觀察,所以在實驗操作中盡量避免或減少氣泡。

1、加熱時培養基融化即可,避免溫度過高產生氣泡。

2、倒平板時盡量貼著平皿壁緩慢倒入,將氣泡留在瓶子底部。

3、如果平板中有少量氣泡的話,可以把氣泡輕搖到平板壁上,這樣不會影響結果觀察。


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