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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
骨 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X8230 |
細胞簡介：
大鼠股骨頭微血管內皮分離自骨組織；股骨頭（caput femoris）呈圓形，約占一圓球的2/3，其上為關節軟骨所覆蓋，在其頂部微后有一小窩，稱為股骨頭凹，為股骨頭韌帶附著處，股骨頭可由此獲得少量血供。股骨頭骨髓的微血管結構為珊瑚狀，后毛細血管微動脈與微靜脈部分膨大、迂曲、互相纏繞；骨微血管內皮細胞構成了骨內微血管的內襯，與骨內其他成分聯系密切，參與了許多骨的病理生理過程在骨吸收新骨的形成血管再生營養物質轉運骨內代謝產物輸出及維持骨內微環境平衡方面具有重要作用。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內皮采用混合膠原酶消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，細胞純度可達90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基：基礎培養基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：內皮細胞樣
傳代特性：可傳1-3代左右；2代以內狀態優良
消化液：0.25%，Accutase
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠股骨頭微血管內皮體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
小鼠蛋白激酶A(PKA)試劑盒 96T/48T
小鼠膽囊收縮素8（CCK-8）試劑盒 96T/48T
小鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 96T/48T
小鼠酯轉移蛋白(CETP)試劑盒 96T/48T
小鼠結腸癌抗原(CCA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human breast cancer susceptibility protein 1 (BFAA-1) ELISA Kit 人癌易感蛋白1(BFAA-1)試劑盒
HumandysophinELISAKit 人肌養蛋白(dysophin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-cenolandcenosomeaibody,ACA試劑盒人抗中性粒/中心體抗體(ACA)試劑盒規格：96T/48T
植物還原型(GSH)濃度比色法定量試劑盒50次
Humanα-Actinin3，ACTN-3ELISAKit人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)試劑盒規格：96T/48T
巴豆酰組蛋白H2B重組兔單克隆抗體
酪激酶B單克隆抗體
RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP4)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白
C. PERFRINGENS NA Protein C.perfringens 重組產氣莢膜梭菌 神經酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)
胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP4)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4)
EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白
RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
C. PERFRINGENS NA Protein C.perfringens 重組產氣莢膜梭菌 神經酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
大鼠股骨頭微血管內皮細胞大鼠白細胞介素2(IL-2)試劑盒 ，英文名： IL-2 ELISA Kit
Mouse macrophage inflammatory protein 2 (MIP-2) ELISA Kit 小鼠巨噬細胞性蛋白2(MIP-2)試劑盒
Mouseperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit人不透光相關蛋白
同位素核酸蛋白結合反應試劑盒20次
sAIL大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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