NobleRyder BC8073脯an酸(Pro)含量檢測(cè)試劑盒 Proline (Pro) Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC8073

產(chǎn)品名稱(chēng)：脯an酸(Pro)含量檢測(cè)試劑盒 Proline (Pro) Content Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T/96S

脯an酸Pro含量檢測(cè)試劑盒 抗逆

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

自備試劑：該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑，詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)

中文名稱(chēng)：脯an酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng)：Proline (Pro) Content Assay Kit

規(guī)格：100T/96S

檢測(cè)方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲(chǔ)存條件：Store at 2-8℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder BC8073脯an酸(Pro)含量檢測(cè)試劑盒 Proline (Pro) Content Assay Kit

測(cè)定意義：Pro廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，逆境條件下，植物體內(nèi)Pro含量顯著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性強(qiáng)的品種往往積累較多的脯an酸。因此，脯an酸增加量可以作為抗逆育種的生理指標(biāo)之一。

測(cè)定原理：用磺基水楊酸（SA）提取Pro，加熱處理后，Pro與酸性茚三酮溶液反應(yīng)生成紅色；加甲苯萃取后，在520nm測(cè)定吸光度。

需要的儀器，耗材:可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、冰乙酸25mL、研缽、冰和蒸餾水。

產(chǎn)品說(shuō)明:

脯an酸(Pro)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，逆境條件下，植物體內(nèi)Pro含量顯著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性強(qiáng)的品種往往積累較多的脯an酸。因此，脯an酸增加量可以作為抗逆育種的生理指標(biāo)之一。

用磺基水楊酸(SA)提取Pro，加熱處理后，Pro與酸性茚三酮溶液反應(yīng)生成紅色，在520nm測(cè)定吸光度。

技術(shù)指標(biāo):

zui低檢出限:0.2876 μg/mL

線性范圍:0.5-40μg/mL

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰乙酸(>98%，AR)、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn))

Solar

1、細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣本的制備:

細(xì)菌或細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，棄上清;按照每500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率200W，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次)，之后置沸水浴振蕩提取10min(纏封口膜，防止爆蓋):10000g，常溫離心10min，取上清，冷卻后待測(cè)。

組織:稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min(纏封口膜，防止爆蓋)，10000g，常溫離心10min，取上清，冷卻后待測(cè)。

2、血清(漿)樣本:取0.1mL血清(漿)加入0.9mL提取液，充分混勻，之后置沸水浴振蕩提取10分鐘(纏封口膜，防止爆蓋)，10000g，常溫離心10分鐘，取上清，冷卻后待測(cè)。

二、測(cè)定步驟

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至520nm，分光光度計(jì)用蒸餾水調(diào)零。

2、標(biāo)準(zhǔn)品的處理:將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋為40、20、10、8、4、2、1、0.5μg/mL。

三、Pro 含量計(jì)算

1、以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，ΔA標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程y=kx+b，將△A代入方程得到x(μg/mL)。

2、按照細(xì)菌、細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

細(xì)胞或細(xì)菌中脯an酸含量(μg/104cell)=xxV提+細(xì)胞;細(xì)菌數(shù)量=x+細(xì)胞/細(xì)菌數(shù)量

3、按照組織質(zhì)量計(jì)算

Pro含量(μg/g質(zhì)量) =xxV 提+W=x+W

4、按照血清(漿)體積計(jì)算

Pro含量(μg/mL)=10xx

V提:加入提取液體積，ImL:W:樣本質(zhì)量，g;細(xì)胞/細(xì)菌數(shù)量:以104為單位，萬(wàn)個(gè):10:血清稀釋倍數(shù)，(0.1+0.9)+0.1=10。

脯an酸Pro含量檢測(cè)試劑盒 抗逆 

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