果糖（fructose ，F(xiàn)T）含量試劑盒說(shuō)明書(shū)

微量法 100 管/96 樣

果糖fructose FT含量試劑盒 糖代謝

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

果糖是一種最為chang見(jiàn)的己酮糖，是葡萄糖的同分異構(gòu)體，以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中，能與葡萄糖結(jié)合生成蔗糖。果糖是最甜的單糖，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、保健品生產(chǎn)中。

測(cè)定原理：

果糖與間苯er酚反應(yīng)，生成有色物質(zhì)，在 480nm 下有特征吸收峰。

組成：

試劑一：1mg/ml 標(biāo)準(zhǔn)液 10ml×1 瓶，4℃保存

自備儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、蒸餾水

果糖提取：

稱(chēng)取 0.1~0.2g 樣本，常溫研碎；加入 0.5ml 提取液，適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中；置于 80℃水浴鍋中 10min（蓋緊，以防止水分散失），振蕩 3~5 次，冷卻后，4000g，25℃離心 10min，取上清；加入少量（約 2mg）試劑四，80℃脫色 30min（蓋緊，以防止水分散失）；再加入 0.5ml 提取液，4000g，25℃離心 10min，取上清液測(cè)定。

測(cè)定步驟:

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 480nm，蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測(cè)定，（在EP 管中依次加入下列試劑）：

混勻，95℃水浴反應(yīng) 30min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后取 200μl 至微量石英比色皿或 96 孔板中測(cè)定 480nm 處光吸收值，空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管分別記為 A1、A2 和A3。空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只要做一管。

果糖含量計(jì)算：

1、果糖含量(mg/mg prot）=（C 標(biāo)準(zhǔn)管×V1）×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷（V1×Cpr）= (A3-A1)÷（A2-A1) ÷Cpr

此法需要自行測(cè)定蛋白濃度。

2、果糖含量(mg/g 鮮重)=(C 標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W。

C 標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，1mg/ml；V1：加入樣本體積，0.03ml；V2：加入提取液體積，1ml； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g。

注意：最di檢測(cè)限為 100ng/g 鮮重或 1ng/mg prot

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