目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學試劑>>培養(yǎng)基>> 半乳糖自誘導培養(yǎng)基
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 200 mL |
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貨號 | XY-D-1679 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Galactose Auto-induction Medium |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 24個月 |
產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品是在 pET 專用生長培養(yǎng)基的基礎上開發(fā)而成的,它利用E.coli自身對 培養(yǎng)基中不同碳源的調(diào)控利用機制,實現(xiàn)外源蛋白在細菌達到飽和生長期后的半乳 糖啟動子的自動誘發(fā)。
產(chǎn)品特點:
1.本產(chǎn)品自動誘導表達,不需要添加任何 IPTG 或相關誘導物,節(jié)約成本。
2.免去了密切監(jiān)控菌液密度的過程,節(jié)約人力物力,尤其適合大規(guī)模篩選。
3.可將細菌的生長密度 OD600 從 2 左右提高 20 以上,增加產(chǎn)量。
4.可極大提高外源蛋白的表達量,最高可占細菌總蛋白的 45%,增加得率。
5.與各種細胞培養(yǎng)容器(如培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)罐、深孔管、發(fā)酵罐等)兼容。
6.適用于 T7 RNA 聚合酶基因由lac啟動子控制的任何細菌表達系統(tǒng),如 pET 系列。
7.不適用于lacZ或lacY突變的宿主菌。
8. 本產(chǎn)品即開即用,非常方便。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品規(guī)格
成份規(guī)格包裝
半乳糖自誘導培養(yǎng)基200mL250mL 本色瓶
使用手冊1 份無
保存和運輸
常溫運輸及保存,有效期兩年。
自備試劑
蒸餾水、含有 1%葡萄糖的 LB 培養(yǎng)基。
使用方法:
1.將構(gòu)建好的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入細菌,如 BL21(DE3),涂于自備的、含有 1%葡萄糖的 LB 培養(yǎng)基中(需要加入適當濃度的抗菌素),37℃培養(yǎng)過夜。
2.挑取單個細菌接種到自備的、含適當濃度抗菌素的液體 LB 培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)直到菌液渾濁但不飽和(一般需要 6-8 小時)。
3.將所得菌液按千分之一的體積比例加入到半乳糖自誘導 培養(yǎng)基工作液中(如果自誘導培養(yǎng)基體積是 100mL,則加入 100μL 菌液),同時加入適當?shù)目咕亍W⒁猓涸谧哉T導培養(yǎng)基中,如果使用卡拉霉素,其終濃度比一般的培養(yǎng)基高, 需要 100μg/mL。由于本方法所得菌液密度大,故需要大量氧氣,因此培養(yǎng) 基的體積不能超過三角瓶的五分之一。三角瓶底最好是皺褶式的,這樣搖晃中氧氣供應更充分。
4.37℃培養(yǎng)過夜。
5.收集菌液并按常規(guī)操作進行蛋白純化。
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