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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50次 |
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貨號 | XY-D-1773 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Endotoxin Removal Reagent for DNA Solution |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 2年 |
產品簡介:
革 蘭 氏 陰 性 細 菌 ( 如 大 腸 桿 菌 ) 的 細 胞 表 面 的 結 構 成 分 LPS(lipopolysaccharides,脂多糖)就是內毒素,因此純化的革蘭氏陰性細菌基因組 DNA 和質粒 DNA 中幾乎都有內毒素污染。內毒素對原代細胞、傳代細胞和整體動物均具有顯著的毒性作用,這也是為何被叫做內毒素的原因。因此去除DNA 樣本中的內毒素具有重要的意義,本產品就是專門用于高效去除 DNA 樣品中的內毒素污染的試劑。
產品特點:
1.簡單快速,一次處理只需要 30 分鐘左右,不需要復雜儀器設備。
2.高效,一次處理可以去除 90%以上的內毒素,經過三次重復抽提可將內毒素的水平降低到 0.2 EU (Endotoxin Unit,約 0.1 ng LPS)/mL 以下。
3.不影響 DNA 的活性和完整性,處理過的 DNA 可以直接用于活體細胞科研或活體生物科研,也可以用于常規的分子生物學研究。
4.適用范圍廣,可用于處理各種來源的 DNA(基因組 DNA 和質粒 DNA)和各種形狀的 DNA(單鏈和雙鏈,線狀和環狀)。
5.既可小規模使用(在 1.5 mL 離心管內),也可放量使用。
6.本產品提供的試劑足夠進行 50 次處理(每次處理 300 ?L 樣本,每個樣本處理三次)。
7.DNA 溶液內毒素清除劑只能用于科研。
產品參數:
成分規格包裝
DNA 溶液內毒素清除溶液 A1.5 mL1.5 mL 白蓋管
DNA 溶液內毒素清除溶液 B1.5 mL1.5 mL 藍蓋管
使用手冊1 份無
運輸及保存
常溫運輸和保存,有效期兩年。
自備試劑
TE、無水乙醇、75%乙醇。
使用方法:
一:微量處理(用于體積小于 300 ?L 樣品)
1. 在一干凈的 1.5 mL 的塑料離心管中加入濃度在 0.1-1 ?g/?L 的 300 ?L 的待處理 DNA 樣品(來于基因組 DNA 提取和質粒 DNA 提取)。如果體積不足 300 ?L,可以用自備的 TE 補足到 300 ?L。如果濃度不到此范圍,可以
用本公司的核酸濃縮劑濃縮或乙醇沉淀后再用小體積 TE 溶解。
2.加入 30 ?L DNA 溶液內毒素清除溶液 A。
3.加入 10 ?L DNA 溶液內毒素清除溶液 B,渦旋振蕩器充分震蕩 1 分鐘混勻。
4.臺式搖床上室溫搖晃 20 分鐘。
5.再放置到金屬浴上 50℃保溫 10 分鐘。
6.臺式離心機室溫 13000-15000×g 離心 3 分鐘,離心后上層為無色透明, 下層為淡藍色。注意:此步不能低溫離心。
7.小心將上清(含 DNA)轉移到新的離心管中,注意不要吸取下層(含內毒素)的液體。
8.此上清液就是去除內毒素后的 DNA 溶液,留樣少許,剩下的樣品可以重復3-7 步兩次,最后比較三次處理得到的 DNA 溶液的殘留內毒素含量,并據此確定今后處理此類 DNA 溶液所需要的抽提次數。一般對內毒素污染嚴重的 DNA 溶液(含 1000 EU 左右的),需要抽提三次。如果起始含量低的,可能只需要一次。
9.加入自備的兩倍體積的無水乙醇,混勻后 13000-15000×g 離心 5 分鐘。
10.小心吸棄上清。
11.加入 1mL 自備的 75%乙醇,顛倒 3 次。12. 13000-15000×g 離心 2 分鐘。
13. 小心吸棄上清。
14. 13000-15000×g 離心 10 秒。
15.小心吸棄殘留上清(約 50 ?L)。
16.加入適量的 TE 溶解 DNA 沉淀。
17.測試殘留內毒素的含量。如果內毒素含量已經減低到可以接收的水平,則可將 DNA 溶液用于各種后續實驗,包括酶切電泳,活性檢測,處理培養細胞, 打入活體實驗動物等。注意:本產品只能用于科研,故不能將得到的 DNA 打入人體。
二:用于體積大于 500 ?L 的 DNA 樣品
18.整個操作同上,只是在 15 或 50 mL 塑料離心管中進行,離心速度不能超過離心管的承受力。
選擇我們的DNA 溶液內毒素清除劑,就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護航!