目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>清除劑>> 蛋白溶液內(nèi)毒素清除劑
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更新時(shí)間:2025-05-19 21:53:23瀏覽次數(shù):85評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
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貨號(hào) | XY-D-1784 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Endotoxin Removal Reagent for Protein Solution |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 2年 |
產(chǎn)品簡介:
革 蘭 氏 陰 性 細(xì) 菌 ( 如 大 腸 桿 菌 ) 的 細(xì) 胞 表 面 的 結(jié) 構(gòu) 成 分 LPS(lipopolysaccharides,脂多糖)就是內(nèi)毒素,因此從革蘭氏陰性細(xì)菌,如大腸桿菌,中純化的重組蛋白幾乎都有內(nèi)毒素污染。內(nèi)毒素對(duì)原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞 和整體動(dòng)物均具有顯著的毒性作用,這也是為何被叫做內(nèi)毒素的原因。因此去除 蛋白樣本中的內(nèi)毒素具有重要的意義。本產(chǎn)品就是專門用于高效去除蛋白樣品中 的內(nèi)毒素污染的試劑。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.操作簡單,不需要復(fù)雜儀器設(shè)備。
2.高效,一次處理可以去除 95%以上的內(nèi)毒素。
3.不影響蛋白質(zhì)的活性和完整性,處理過的蛋白可以直接用于后續(xù)的各種實(shí)驗(yàn), 包括抗體制備或其他活體細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。
4.適用范圍廣,可用于處理各種水溶性蛋白質(zhì),但本產(chǎn)品不能用于膜蛋白和疏水蛋白溶液。
5.既可小規(guī)模使用(在 1.5 mL 離心管內(nèi)),也可放量使用。
6.本產(chǎn)品提供的試劑足夠進(jìn)行 50 次處理(每次處理 500 μL 樣本,每個(gè)樣本處理三次)。
7.本產(chǎn)品只能用于科研。
產(chǎn)品參數(shù):
成份規(guī)格包裝
蛋白溶液內(nèi)毒素清除劑1.5 mL1.5 mL 藍(lán)蓋管
使用手冊(cè)1 份1 份
運(yùn)輸及保存
常溫運(yùn)輸和保存,有效期兩年。
自備試劑
無內(nèi)毒素水。
使用方法:
注意:緩沖體系需避免高鹽,需保持 pH 在 6.0-8.0;體系還需避免干擾物質(zhì)如: 強(qiáng)氧化劑、還原劑(DTT);金屬離子可能會(huì)影響分相效率,必要時(shí)可以添加 EDTA等螯合劑;如果需實(shí)驗(yàn)對(duì)毒性有要求可在得到去除內(nèi)毒素的蛋白溶液后進(jìn)行透析、疏水層析等。
一:微量處理(用于體積小于 500 μL 樣品)
1. 可調(diào)溫度的離心機(jī)調(diào)至 37℃預(yù)熱,不可調(diào)節(jié)溫度的離心機(jī)放在 37℃孵化箱
中預(yù)熱。
2.蛋白溶液內(nèi)毒素 清除劑和待處理蛋白溶液需要在冰上預(yù)冷 5-10 min。
3.在一干凈的 1.5 mL 的塑料離心管中加入濃度為 10 mg/mL 的 500 μL 的待處理蛋白溶液。如果體積不足 500 μL,可以用自備的水補(bǔ)足到 500 μL。
4.加入 10 μL 蛋白溶液內(nèi)毒素 清除劑。
5.充分震蕩 1 分鐘混勻,此時(shí)呈混濁狀。
6.插冰中搖床上搖晃 30 分鐘。
7.放置在 37℃保溫 10 分鐘。
8.經(jīng) 37℃預(yù)熱的可調(diào)溫度的離心機(jī)或不可調(diào)溫度的離心機(jī)預(yù)熱后立刻室溫15,000×g 離心 20 分鐘,液體將分為上下兩層。注意:此步不能低溫離心。
9.小心將上清(含蛋白質(zhì))轉(zhuǎn)移到新的離心管中,注意不要吸取下層(含內(nèi)毒 素)的液體。
10.重復(fù)第 4 步到第 9 步兩次(從加入 10 μL 蛋白溶液內(nèi)毒素 清除劑到取出上清)。
11.將裝有上清的離心管放入臺(tái)式離心機(jī),室溫 15,000×g 離心 20 分鐘,離心后小心轉(zhuǎn)移上清到一新的離心管中,管底可能有少量油滴狀液體,不要觸 及。注意:此步不能低溫離心。
12.所得上清液就是去除內(nèi)毒素后的蛋白溶液,可以直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
二:用于體積大于 500 μL 的蛋白樣品
13.整個(gè)操作同上,只是在 15 或 50 mL 塑料離心管中進(jìn)行,離心速度不能超過離心管的承受力。
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