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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 96T/48T |
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貨號 | XY-S0785 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
主要用途 | 科研 | 保存條件 | 2-8℃ |
有效期 | 6個月 | 樣本 | 血清,血漿及相關液體 |
玉米赤霉烯酮(ZEN)ELISA試劑盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月
實驗原理
本試劑盒采用競爭ELISA方法,在微孔板包被有玉米赤霉烯酮(ZEN)偶聯抗原,加入玉米赤霉烯酮(ZEN)標準品或樣品,游離玉米赤霉烯酮(ZEN)與微孔條上預包被的玉米赤霉烯酮(ZEN)偶聯抗原互相競爭抗玉米赤霉烯酮(ZEN)抗體酶標記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍色變為黃色,用酶標儀在450nm波長下進行檢測,吸光值與樣品中玉米赤霉烯酮(ZEN)含量成反比,通過標準曲線計算樣品中玉米赤霉烯酮(ZEN)的含量。
試劑盒組成
預包被的玉米赤霉烯酮(ZEN)偶聯抗原的可拆酶標板:1塊(12孔×8條)。
玉米赤霉烯酮(ZEN)標準品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是: 0 ng/ml,0.5 ng/ml,2 ng/ml,20 ng/ml,200 ng/ml,400 ng/ml。
抗玉米赤霉烯酮(ZEN)抗體酶結合物:1瓶(6ml)。
顯色液A:1瓶(6ml)。
顯色液B:1瓶(6ml)。
終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。
樣本-稀釋液:1瓶(10×, 6ml),用于樣品稀釋用。
濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。
說明書一份。
操作步驟
實驗開始前請將所有試劑于盒外充分恢復至室溫(25±2℃),時間約2小時。回溫至室溫(25±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的精確度和準確度。
使用后請立即將試劑放回2~8℃保存
請不要改變分析程序
請使用精確的微量移液器
操作一旦開始,請不要中斷任何程序
ELISA結果的可重復性極大程度的取決于操作程序,請嚴格按照要求操作
為避免交叉污染,每個標準品和樣品均應使用不同的吸頭加樣
加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內表面
分析步驟
預先進行編號,標記B0、標準品和樣品的位置,推薦進行雙孔檢測
取所需數量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(20×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)
在B0孔中加入50µl 0.0 ng/ ml標準品溶液
在各標準孔中加入50μl的標準品溶液
在各樣品孔中加入50µl樣品溶液
在所有孔中加入50µl的抗玉米赤霉烯酮(ZEN)抗體酶結合物
輕輕晃動反應板幾秒鐘。
37℃溫浴30min (溫浴過程中不時輕拍反應板,可以減少雙孔誤差)
甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,最后一次應在吸水紙上拍打以完-全除去孔中液體。
反應
洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50µl顯色液A,再加 50µl顯色液B;輕微晃動反應板使之徹-底混勻
37℃溫浴10min
每孔中加入50µl終止液,混勻
在450nm下檢測吸光度,結果在5min內讀取。
結果計算
定量分析
所獲得的每個濃度標準溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以第一個標準(0標準)的吸光度值(B0)再乘以100%,即百分吸光度值。
B—標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0—0 ng/ml標準溶液的平均吸光度值
以玉米赤霉烯酮(ZEN)濃度的對數值為X軸,百分吸光度值為Y軸,繪制標準曲線圖。根據樣品百分吸光度值,可從曲線上得到對應點的橫坐標,即為玉米赤霉烯酮(ZEN)濃度的對數值,求得反對數即為測定液中玉米赤霉烯酮(ZEN)濃度C(ppb)
由于樣品經過了預先稀釋,因此根據標準曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數。
半定量測定
目測半定量測定:首先選擇一個適當的標準液與樣品同運行,根據樣品與標準品吸光度值的高低比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。
儀器半定量測定:首先選擇一個適當的標準液與樣品同運行,根據樣品與標準品顏色深淺比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。
特異性
物質 交叉反應
玉米赤霉烯酮………………………………………100%
玉米赤霉酮…………………………………………13%
玉米赤霉醇…………………………………………<1%
試劑盒參數
本試劑盒檢測下限為0.05ng/ml
B0吸光度最佳值應大于1.0
試劑盒吸光度板內誤差小于8%,板間誤差小于15%。
用本說明書提供的組織樣本提取方法回收率大于80%。
試劑盒提供的標準曲線范圍為0 ng/ml ~ 400ng/ml。
分析限制
玉米赤霉烯酮(ZEN)ELISA試劑盒檢測為陽性的樣品應該用另一種方法如HPLC或GC/MS加以確證。