| 供貨周期 |
一個月 |
應(yīng)用領(lǐng)域 |
化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
人熱休克因子1試劑盒借 ELISA 原理，精準(zhǔn)測 HSF1 含量。操作規(guī)范，用于腫瘤、神經(jīng)及心血管研究，助機(jī)制探究與診療，優(yōu)勢突出。
人熱休克因子1試劑盒
人熱休克因子1試劑盒是生物醫(yī)學(xué)研究與臨床檢測中，用于精準(zhǔn)測定人體樣本中人熱休克因子 1（HSF1）含量的關(guān)鍵工具。HSF1 作為一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，在細(xì)胞應(yīng)對熱應(yīng)激、氧化應(yīng)激、化學(xué)毒物刺激等多種應(yīng)激反應(yīng)中扮演核心角色。當(dāng)細(xì)胞受到外界刺激時，HSF1 被激活，進(jìn)而調(diào)控一系列熱休克蛋白基因的表達(dá)，對維持細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)、促進(jìn)細(xì)胞存活及修復(fù)損傷起到關(guān)鍵作用。準(zhǔn)確檢測 HSF1 含量，對于深入探究細(xì)胞應(yīng)激機(jī)制、疾病發(fā)生發(fā)展過程以及評估治療效果具有重要意義。
該試劑盒基于經(jīng)典的酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）原理構(gòu)建。試劑盒內(nèi)的酶標(biāo)板預(yù)先包被有針對人 HSF1 的高特異性抗體。當(dāng)含有 HSF1 的樣本，如細(xì)胞裂解液、組織勻漿、血清或血漿等加入酶標(biāo)板孔中時，樣本里的 HSF1 抗原會迅速與包被抗體特異性結(jié)合，形成抗原 - 抗體復(fù)合物。隨后加入酶標(biāo)記的另一種針對 HSF1 的抗體，該抗體能夠識別已結(jié)合在包被抗體上的 HSF1，進(jìn)而構(gòu)建起穩(wěn)定的抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。加入酶的底物后，在酶的催化作用下，底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色的深淺與樣本中 HSF1 的含量呈正相關(guān)。通過酶標(biāo)儀在特定波長下測定吸光度，并與試劑盒所提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線比對，即可精確計算出樣本中 HSF1 的含量。
在操作流程方面，規(guī)范采集樣本是首要步驟。以細(xì)胞裂解液樣本制備為例，需嚴(yán)格遵循細(xì)胞培養(yǎng)及裂解的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。培養(yǎng)細(xì)胞時要保證細(xì)胞處于良好的生長狀態(tài)，收集細(xì)胞后，使用合適的裂解液在冰上充分裂解細(xì)胞，確保 HSF1 充分釋放且不被降解。從冷藏環(huán)境取出試劑盒后，需將其置于室溫環(huán)境平衡一段時間，使試劑盒各組分達(dá)到適宜的反應(yīng)溫度。嚴(yán)格按照說明書，精確吸取適量樣本、不同濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品以及空白對照，分別加入酶標(biāo)板相應(yīng)孔中。加入酶標(biāo)抗體后，輕輕振蕩使反應(yīng)體系充分混勻，然后將酶標(biāo)板放入 37℃恒溫孵育箱中，孵育特定時間，確保抗原抗體反應(yīng)充分進(jìn)行。孵育結(jié)束，用洗滌緩沖液多次洗滌酶標(biāo)板，徹di清除未結(jié)合的多余物質(zhì)，降低非特異性干擾。緊接著加入底物溶液，在避光條件下進(jìn)行顯色反應(yīng)，在規(guī)定時間內(nèi)迅速用酶標(biāo)儀讀取各孔吸光度數(shù)值，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線確定樣本中 HSF1 的濃度。
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