皖儀科技·草甘膦高效液相色譜儀-柱后衍生專機(jī)系統(tǒng)

本篇文章參考了《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》GB/T 5750.9-2023草甘膦高效液相色譜-柱后衍生法的方法條件，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置熒光檢測器、柱后衍生系統(tǒng)進(jìn)行檢測。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品線性良好，R值在0.999以上，草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰分離正常，理論塔板數(shù)在7000以上。草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)進(jìn)樣6次，定性RSD值為0.188%，定量RSD值為0.382%，重復(fù)性較好。使用配備皖儀科技LC3200系列儀器檢測草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品的檢測限為1.4μg/L。自來水中草甘膦加標(biāo)濃度分別為100μg/L、50μg/L、25μg/L重復(fù)測定6次進(jìn)行分析，計(jì)算得草甘膦相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.256%、0.590%、0.518%，加標(biāo)回收率分別為99.8%-100.4%，98.9%-100.5%，97.5%-98.5%，符合《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》GB/T 5750.9-2023草甘膦高效液相色譜-柱后衍生法的方法要求。說明該方法配備皖儀科技LC3200系列儀器完全滿足草甘膦的檢測需求。

1 方法原理

草甘膦經(jīng)陰離子交換色譜柱中實(shí)現(xiàn)分離后，在衍生池與衍生劑反應(yīng)，先用次氯酸鹽溶液將草甘膦氧化成氨基乙酸；然后氨基乙酸與鄰苯二醛（OPA）和2-巰基乙醇（MERC）的混合液反應(yīng)，形成一種強(qiáng)光的異吲哚產(chǎn)物，使用靈敏度更高的熒光檢測器進(jìn)行檢測。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 儀器配置

       皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列

2.2 測試條件

液相色譜條件

流動相：5L純水加入26mL磷酸、2.7mL硫酸；色譜柱：陰離子交換柱，5μm, 4.6×250mm；柱溫：50℃；流速：0.5mL/min；進(jìn)樣量：200μL；

柱后衍生系統(tǒng)

衍生溶液1：次氯酸鹽氧化劑；衍生溶液1流速：0.5mL/min；衍生反應(yīng)池1溫度：50℃；衍生溶液2：OPA（鄰苯二醛）-MERC（2-巰基乙醇）溶液；衍生溶液2流速：0.4mL/min；衍生反應(yīng)池1溫度：38℃；激光波長：340nm；發(fā)射波長：445nm。

2.3 實(shí)驗(yàn)材料及輔助設(shè)備

磷酸：優(yōu)級純；

硫酸：優(yōu)級純；

甲醇：色譜純；

磷酸二氫鉀：優(yōu)級純；

氯化鈉：優(yōu)級純；

氫氧化鈉：分析純；

次氯酸鈣：有效氯70.9%；

鄰苯二醛（OPA）：用于HPLC熒光標(biāo)記;

2-巰基乙醇（MERC）；

硼酸：分析純；

氫氧化鉀：分析純；

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：草甘膦，純度≥99.5%；

微孔濾膜（0.22μm）；

磁力攪拌器；超聲波清洗機(jī)。

2.4 溶液配制

n  2.4.1 氧化劑

稱取0.5g次氯酸鈣溶解于500mL純水中，用磁力攪拌器快速攪拌45min。取10mL次氯酸鈣儲備溶液于1L的容量瓶中，加入1.74g磷酸二氫鉀、11.6g氯化鈉、0.4g氫氧化鈉，加水稀釋，定容，混勻。經(jīng)0.22μm的濾膜過濾。

n  2.4.2 OPA-MERC溶液

將100g硼酸和72g氫氧化鉀溶于700mL純水中并轉(zhuǎn)移至1L的容量瓶中，需1h～2h；加入含0.8g OPA的5mL甲醇溶液，2.0mL MERC，混勻。

n  2.4.3 草甘膦標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（100μg/mL）

用純水配制草甘膦質(zhì)量濃度為100μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。儲存于聚丙烯瓶中，0℃～4℃冷藏保存。每月重新配制。

n  2.4.4 草甘膦標(biāo)準(zhǔn)使用溶液

用純水對100μg/mL的草甘膦標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液進(jìn)行稀釋，配制質(zhì)量濃度分別為10μg/mL和1.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)使用溶液。儲存于聚丙烯瓶中，0℃～4℃冷藏保存，現(xiàn)配現(xiàn)用。

n  2.4.5 標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液

用純水對草甘膦標(biāo)準(zhǔn)使用溶液進(jìn)行稀釋，配制質(zhì)量濃度為0μg/mL、0.025μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，儲存于聚丙烯瓶中。使用前取200μl注入色譜儀。

3 結(jié)果與討論

3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

      圖1 草甘膦標(biāo)準(zhǔn)曲線及相關(guān)系數(shù)

說明：草甘膦標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍較好，線性相關(guān)系數(shù)＞0.999，滿足實(shí)驗(yàn)分析需求。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)品

         圖2 草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

說明：由上述譜圖可見，草甘騰標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰正常，理論塔板數(shù)在 7000 以上。

3.3 重復(fù)性

     圖3 草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)性實(shí)驗(yàn)色譜圖

說明：草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)進(jìn)樣6次，保留時間RSD值為0.188%，峰面積RSD值為0.382%，重復(fù)性較好。

3.4 檢出限

          圖4 單進(jìn)純水色譜圖

        圖5 草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

說明：實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明使用配備皖儀科技LC3200系列儀器檢測草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品的檢測限為1.4μg/L。

3.5 加標(biāo)回收驗(yàn)證

對自來水進(jìn)行低、中、高濃度加標(biāo)重復(fù)測定，草甘膦加標(biāo)濃度分別為100μg/L、50μg/L、25μg/L，分別重復(fù)測定6次進(jìn)行分析。

    圖6 自來水加標(biāo)50μg/L草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

說明：自來水中草甘膦加標(biāo)濃度分別為100μg/L、50μg/L、25μg/L重復(fù)測定6次進(jìn)行分析，計(jì)算得草甘膦相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.256%、0.590%、0.518%，加標(biāo)回收率分別為99.8%-100.4%，98.9%-100.5%，97.5%-98.5%，滿足《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》GB/T 5750.9-2023草甘膦 高效液相色譜-柱后衍生法的方法要求。

3.6 樣品測試

取自來水進(jìn)行測試，加入100mg/L的硫代硫酸鈉消除氯帶來的影響，經(jīng)0.22μm的濾膜過濾。進(jìn)樣量取200μL上樣分析，檢測譜圖如下：

         圖7 自來水樣品色譜圖

說明：從檢測結(jié)果可知，自來水樣品中未檢出草甘膦，結(jié)果正常。

4 結(jié)論

本文依據(jù)《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》GB/T 5750.9-2023草甘膦 高效液相色譜儀-柱后衍生法，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置熒光檢測器、柱后衍生系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，草甘膦的線性良好，R值在0.999以上，草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰分離正常，理論塔板數(shù)在7000以上。草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)進(jìn)樣6次，定性RSD值為0.188%，定量RSD值為0.382%，重復(fù)性好，使用皖儀科技LC3200系列儀器檢測草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品的檢測限為1.4μg/L。自來水中草甘膦加標(biāo)濃度分別為100μg/L、50μg/L、25μg/L重復(fù)測定6次進(jìn)行分析，計(jì)算得草甘膦相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.256%、0.590%、0.518%，加標(biāo)回收率分別為99.8%-100.4%，98.9%-100.5%，97.5%-98.5%。符合《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》GB/T 5750.9-2023草甘膦 高效液相色譜-柱后衍生法的方法要求。說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列儀器檢測草甘膦的可行性，完全滿足草甘膦的檢測需求。