可見分光光度計是一種常用的分析儀器,以下是一些使用可見分光光度計之前的準備:
儀器預熱
接通電源后,打開儀器開關,預熱30分鐘左右,使儀器達到穩定的工作狀態。這是因為儀器內部的光源、檢測器等部件需要一定時間來穩定性能,以確保測量結果的準確性。
樣品準備
樣品溶液的配制:確保樣品具有代表性,稱取適量的樣品,采用適當的溶劑溶解并定容至一定體積,配制成濃度準確的樣品溶液。在配制過程中,要使用精度較高的天平、容量瓶、移液管等儀器,并嚴格按照操作規程進行操作,以減少配制過程中的誤差。
樣品的澄清度和均勻度:樣品溶液應澄清透明,無懸浮物、沉淀或氣泡。如有不溶物,需進行過濾或離心處理,以免影響光的透過和散射,導致測量誤差。對于一些易發生沉淀或分層的樣品,在測量前應充分搖勻,保證樣品的均勻性。
波長校準
使用前,需要對儀器的波長進行校準。可采用標準波長物質,如鐠釹濾光片,其在特定波長處有特征吸收峰。將濾光片放入樣品池中,在儀器上掃描其吸收光譜,根據濾光片的標準吸收波長,調整儀器的波長刻度,使儀器顯示的波長與標準波長一致。一般來說,儀器在使用一段時間后或對測量精度要求較高時,都需要進行波長校準,以確保測量波長的準確性。
吸光度校準
進行吸光度校準,即調零和滿度校準。首先,將參比溶液(通常是空白溶液,即不含被測物質的溶液)放入樣品池中,放入光路中,調節儀器的吸光度為零,這一步驟稱為“調零”。然后,用空氣或參比溶液作為100%透光率的基準,調節儀器的透光率為100%,即吸光度為零,這一步驟稱為“滿度校準”。在校準過程中,要確保樣品池的透光面清潔無污漬,參比溶液的選擇要準確,以保證校準的準確性。
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