百歐博偉生物：伯杰系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)將其定為軍團(tuán)菌科，軍團(tuán)菌屬。該菌屬較為復(fù)雜，時(shí)有新種發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)已命名的菌種分別來(lái)自人體和環(huán)境，共有39種及3個(gè)亞種，64個(gè)血清型。模式菌是嗜肺軍團(tuán)菌。

1、細(xì)菌特性

（1）形態(tài)染色  

革蘭陰性桿菌，無(wú)芽胞，無(wú)莢膜，有端鞭毛或側(cè)鞭毛，動(dòng)力陽(yáng)性。

（2）培養(yǎng)特性  

能在細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖，專性需氧，同時(shí)生長(zhǎng)環(huán)境中還需2.5%~5%的二氧化碳；其生長(zhǎng)的pH范圍較窄，pH6.4~7.2，在pH1.7時(shí)則死亡；生長(zhǎng)溫度35℃，可生長(zhǎng)的溫度范圍為25℃~42℃，在外環(huán)境中甚至水溫達(dá)63℃時(shí)亦可分離到本菌；營(yíng)養(yǎng)要求苛刻，普通培養(yǎng)基、血平板和巧克力平板均不生長(zhǎng)，生長(zhǎng)過(guò)程中需要多種微量元素作為酶的協(xié)同因子或在代謝中起重要作用，同時(shí)需要氨基酸，以甲硫氨酸和半胱氨酸重要。生長(zhǎng)緩慢，固體培養(yǎng)基在培養(yǎng)48h左右，在濃密涂種處可見生長(zhǎng)。

不同培養(yǎng)基上菌落的形成和表現(xiàn)不同，目前的培基是緩沖活性炭酵母浸出液，加上鐵、L-半胱氨酸和α-酮戊二酸（在不含L-半胱氨酸的BCYE和血平板上不生長(zhǎng)），稱之為BCYEa（buffered charcoal-yeast extract agar）培養(yǎng)基。

（3）生化反應(yīng)  

生化反應(yīng)可作為鑒定時(shí)的參考，大多數(shù)菌種能產(chǎn)生β內(nèi)酰胺酶和液化明膠、水解淀粉，觸酶陽(yáng)性，氧化酶弱陽(yáng)性；硝酸鹽還原、尿素酶和碳水化合物利用反應(yīng)都是陰性；所有嗜肺軍團(tuán)菌血清型（血清型4和15除外）的各個(gè)菌株均具有的水解馬尿酸鹽的作用，而其他軍團(tuán)菌則陰性。

（4）抵抗力  

軍團(tuán)菌已成為天然水環(huán)境中常在的一大類菌群，嗜肺軍團(tuán)菌的生存能力較強(qiáng)，在含有藻類物質(zhì)的氣溶膠中可長(zhǎng)期存活，對(duì)紫外線敏感，對(duì)熱和常用的化學(xué)消毒劑敏感。

2、臨床意義

軍團(tuán)病在世界各地均有發(fā)病，但主要在經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)國(guó)家流行，國(guó)內(nèi)多屬散發(fā)報(bào)道。本菌廣泛存在于土壤及自然和人工的水環(huán)境中，尤其是在空調(diào)冷凝水中的檢出率。大多數(shù)（85%）是嗜肺軍團(tuán)菌引起的，其中嗜肺軍團(tuán)菌1血清型和6血清型占75%。高發(fā)于夏秋季，細(xì)菌通過(guò)空氣傳播，易侵犯患有慢性器質(zhì)性疾病或免疫功能低下的患者，見的是肺炎型。

3、微生物學(xué)檢驗(yàn)

（1）檢驗(yàn)程序。

（2）標(biāo)本采集  

標(biāo)本應(yīng)小心收集避免氣溶膠的形成，于收集后兩小時(shí)內(nèi)用無(wú)菌防漏容器在環(huán)境溫度下小心送到實(shí)驗(yàn)室。

1）適用的標(biāo)本主要包括  咳出的痰、用支氣管鏡收集的材料、經(jīng)氣管吸出物、胸腔積液和血液等。除胸水和血液外，其他標(biāo)本中均混有正常菌群及其他病原菌，正常菌群對(duì)軍團(tuán)菌有殺滅作用，取材后應(yīng)及時(shí)分離培養(yǎng)，并使用加抗生素的選擇培養(yǎng)基。

2）病理組織標(biāo)本  如閉合或開放的肺活檢材料、尸體標(biāo)本及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肝、脾等標(biāo)本必須制成懸液，再進(jìn)行涂片和分離培養(yǎng)。

3）環(huán)境污染標(biāo)本  如水、土壤等，水標(biāo)本應(yīng)先濃縮再接種，土壤標(biāo)本加入水中振蕩30min取水樣，參照水標(biāo)本處理。

（3）檢驗(yàn)方法

1）顯微鏡檢查  標(biāo)本直接涂片革蘭染色，意義不大。

2）分離培養(yǎng)  本菌營(yíng)養(yǎng)要求苛刻，生長(zhǎng)緩慢，在35℃～37℃，相對(duì)濕度70%～80%，2.5%～5.0%CO2環(huán)境下，BCYE培養(yǎng)基上培養(yǎng)2～5d可形成直徑1～2mm有光澤的菌落，在F-G(Feeley-Garman)瓊脂培養(yǎng)基上，培養(yǎng)3～5d可見針尖大小的菌落，在紫外線照射下可產(chǎn)生熒光。標(biāo)本如在血平板、巧克力平板上生長(zhǎng)或在BCYE或F-G平板上24h生長(zhǎng)，則不是軍團(tuán)菌。臨床標(biāo)本如有污染，可在培養(yǎng)基中加入對(duì)軍團(tuán)菌無(wú)抑制作用的抗生素如頭孢噻吩4μg/ml、多粘菌素E16U/ml、萬(wàn)古霉素0.5μg/ml。

3）鑒定  在血平板、巧克力平板及不含L半胱氨酸的BCYE平板上不生長(zhǎng)，而在含有L半胱氨酸的BCYE和F-G培養(yǎng)基上生長(zhǎng)緩慢、形成典型菌落；革蘭陰性小桿菌，有顯著的多形性，均應(yīng)懷疑為軍團(tuán)菌。對(duì)可疑菌株可作直接熒光抗體染色等血清學(xué)鑒定和生化反應(yīng)，必要時(shí)作細(xì)菌脂肪酸的氣液相色譜分析和DNA雜交、PCR試驗(yàn)。

4）免疫學(xué)檢測(cè)  檢測(cè)軍團(tuán)菌血清抗體的方法主要有間接免疫熒光染色（IFA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）及放射免疫測(cè)定等，其中以IFA在臨床應(yīng)用最多。急性期和恢復(fù)期雙份血清抗體效價(jià)增加4倍以上并達(dá)≥1:128或單份血清抗體效價(jià)達(dá)到或超過(guò)1:256為陽(yáng)性。本法取恢復(fù)期血清需時(shí)較久（1～3個(gè)月），且可能與其他細(xì)菌的抗體起交叉反應(yīng)。

5）核酸檢測(cè)  是快速特異方法，常用DNA探針和PCR方法檢測(cè)軍團(tuán)菌rRNA，可用于軍團(tuán)菌的快速診斷。

（4）耐藥性

軍團(tuán)菌體外抗生素敏感性試驗(yàn)尚無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，且與臨床治療反應(yīng)不一致，因此，并不主張對(duì)醫(yī)院診斷實(shí)驗(yàn)室分離的軍團(tuán)菌進(jìn)行體外抗生素敏感性試驗(yàn)。目前已取得明顯臨床效果的抗菌藥物主要是大環(huán)內(nèi)酯類藥物、利福平、氟喹諾酮類藥物，其次是四環(huán)素類。青霉素、頭孢菌素、氨基糖苷類抗生素治療本菌無(wú)效。

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