圖2 巨玫瑰葡萄

圖3 巨玫瑰葡萄植株

   葡萄園隨機選取兩行葡萄植株作為固定采樣點。采樣時兼顧果穗上中下及陰陽面，利用五點取樣法從每穗采集無損傷和病害的葡萄顆粒。采樣周期從葡萄轉色期至成熟期。每隔3～5d進行1次采樣，每次采集 280 ～ 320 粒葡萄，并按照顏色和硬度進行分組，40 粒為一組，分為7～8組。采樣周期內共采集24批試驗樣品，共計178組，每個樣品測定20顆巨玫瑰果粒的光譜信息，并將相應的20顆巨玫瑰果粒－40℃冷凍保存進行后續理化值測定。

 圖4 光譜采集系統

   如圖所示，為減少雜散光干擾，光譜采集在暗室中進行，以白板為背景放置葡萄樣本。采集系統由鹵素燈、光纖探頭、光纖光譜儀、標準漫反射白板及樣本組成。其中鹵素燈光源、暗室、光纖探頭共同構成手柄燈光譜采集模塊，末端通過光纖和光譜儀連接。光譜儀使用奧譜天成（Optosky）的ATP3030高分辨率型微型光纖光譜儀，積分時間1ms，分辨率0.5nm，光譜范圍200-1100nm。

   首先通過光譜采集模塊對準標準漫反射白板，采集其反射光譜作為標準參考數據，再將單粒葡萄樣本放在漫反射白板上并置于手柄燈暗室內，搭配軟件反射率測量模塊，最終獲得該樣本反射光譜。此外，測量過程沿葡萄樣本赤道以120°間隔測量3次取平均值作為最終光譜數據。

圖5 成熟期葡萄反射率曲線

   為消除光譜儀及外界因素影響，去除前端部分光譜波段，選擇波長范圍 400～1100 nm進行后續建模分析。

   在原始光譜中葡萄樣品的可見-近紅外光譜雖存在重疊和交叉的情況，但整體上變化趨勢基本一致。在光譜范圍500～720nm內，光譜曲線存在一定的差異性，原因可能在于葡萄成熟品質不同致使其果皮顏色存在差異，進而影響光譜的吸收。光譜曲線在波長720nm附近存在明顯的吸收峰，分析其原因可能與胡蘿卜素、葉綠素的吸收有關。在光譜范圍850～920nm內，光譜曲線出現吸收帶，其原因可能與酚類和花青素、纖維素和蔗糖等的吸收有關。此外，光譜曲線在1000～1050nm范圍內出現吸收帶，可能與水和維生素等成分有關。

   光譜測量結束后，將葡萄樣品置于－40℃的低溫條件下冷凍保存，待分離葡萄皮、籽，經磨粉、超聲處理、離心、上清液提取后，進行總酚和單寧含量測定。

圖6 總酚標準曲線

   總酚是葡萄皮、籽提取物中主要的酚類物質，采用Folin－Ciocalteu方法測定并進行適當修改。使用沒食子酸標準曲線（mg /g沒食子酸當量）表征總酚含量。

圖7 丹寧標準曲線

   采用甲基纖維素沉淀法測定單寧含量，并根據校準曲線，以mg /g的兒茶素當量表征單寧含量。