引  言

抗體能夠精準(zhǔn)識(shí)別并結(jié)合特定的目標(biāo)分子，在科研、診斷、藥物開發(fā)中是不-可或缺的。就像鑰匙與鎖孔的精密匹配，我們也在不斷改進(jìn)抗體的親和力和特異性。納米級(jí)親和力與單表位特異性是第4代抗體藥物的核心優(yōu)勢(shì)。

兔單克隆抗體的親和力是鼠單克隆抗體的10-100倍，識(shí)別表位更多。義翹神州依托噬菌體展示、單B細(xì)胞流式分選和Beacon®三大技術(shù)，自主搭建了兔單抗開發(fā)平臺(tái)，可提供從抗原設(shè)計(jì)、免疫到抗體純化的一站式兔單抗制備服務(wù)，助力您獲得目標(biāo)應(yīng)用的優(yōu)質(zhì)抗體。

01兔單抗：為何更受歡迎？

與其他物種（如小鼠、大鼠、雞等）相比，兔有著獨(dú)-特的免疫應(yīng)答機(jī)制，B細(xì)胞反應(yīng)庫(kù)是小鼠的50-100倍，意味著兔子可以產(chǎn)生更加多樣的抗體，在鑒定表位變異、突變和構(gòu)象變化等細(xì)微差別方面更具優(yōu)勢(shì)。

兔單抗具有以下優(yōu)勢(shì)：

①親和力

高兔單抗對(duì)目標(biāo)蛋白的親和力一般是鼠單抗的10-100倍，甚至可以達(dá)到皮摩爾級(jí)別。兔抗能夠識(shí)別小鼠中不具有免疫原性的抗原。

②特異性高

對(duì)表位的特定結(jié)構(gòu)具有較高的靈敏度。比如在免疫組化實(shí)驗(yàn)中，兔單抗比鼠單抗的圖像更清晰、背景干擾更低。在一些診斷試劑中，兔單抗能夠檢測(cè)出鼠單抗檢測(cè)不到的弱陽性。

③免疫反應(yīng)強(qiáng)

兔子能夠觸發(fā)更強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)，適用于小分子化合物抗原或半抗原。

④穩(wěn)定性高

兔IgG沒有其他亞型，抗體結(jié)構(gòu)更穩(wěn)定，適合長(zhǎng)期保存和應(yīng)用。

⑤半衰期長(zhǎng)

與鼠單抗相比，兔單抗具有較長(zhǎng)的半衰期和較低的免疫原性。

兔單抗在診斷試劑開發(fā)領(lǐng)域“得天獨(dú)厚”。兔單抗的單表位識(shí)別精度，可使其識(shí)別僅有1個(gè)氨基酸差異的抗原，而鼠單抗一般需要5-6個(gè)的氨基酸差異才能識(shí)別。因此兔單抗可用于KRAS突變體（G12D vs. G12V）、EGFR磷酸化位點(diǎn)的檢測(cè)，在檢測(cè)低豐度蛋白、翻譯后修飾靶點(diǎn)時(shí)靈敏度更高。

02兔單抗之噬菌體展示技術(shù)

噬菌體展示技術(shù)利用基因工程將抗體基因連接到噬菌體中，并以融合蛋白的形式展示在其表面。通過與靶蛋白的結(jié)合完成抗體篩選。噬菌體展示技術(shù)包括噬菌體展示抗體庫(kù)構(gòu)建、淘洗、單克隆鑒定和陽性克隆重組表達(dá)等步驟。義翹神州利用靈活的篩選策略、多種篩選方法以及上清介入檢測(cè)，篩選的成功率達(dá)到90%。

03兔單抗之單B細(xì)胞流式分選技術(shù)

單B細(xì)胞抗體制備技術(shù)是一類快速制備單克隆抗體的技術(shù)。單個(gè)B細(xì)胞只含有一個(gè)功能性重鏈和輕鏈可變區(qū)DNA序列，即只產(chǎn)生一種特異性抗體。利用這一特性，從免疫動(dòng)物組織或外周血中分離抗原特異性B細(xì)胞，然后通過單細(xì)胞PCR技術(shù)擴(kuò)增IgG重鏈和輕鏈可變區(qū)基因，再通過哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)獲得具有生物活性的單抗。

義翹神州單B細(xì)胞流式分選后的細(xì)胞有兩種處理方式：一是直接裂解細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增，最-大限度的得到陽性克隆；二是將分選好的單細(xì)胞先在體外培養(yǎng)擴(kuò)增，再挑選陽性細(xì)胞克隆擴(kuò)增抗體可變區(qū)基因，最后進(jìn)行抗體的重組表達(dá)和驗(yàn)證。義翹神州單B細(xì)胞流式分選技術(shù)可一天完成10板抗原特異性B細(xì)胞分選（1000個(gè)），10-12天完成單B細(xì)胞培養(yǎng)。

義翹神州單B細(xì)胞流式分選技術(shù)的優(yōu)勢(shì)

04兔單抗之單B細(xì)胞Beacon®篩選平臺(tái)

Beacon®單細(xì)胞光導(dǎo)系統(tǒng)結(jié)合光電定位技術(shù)與微流控設(shè)計(jì)，在一張芯片上精準(zhǔn)完成單細(xì)胞挑選和檢測(cè)，還可根據(jù)實(shí)驗(yàn)時(shí)特定的結(jié)果導(dǎo)出目的細(xì)胞，更好的保留B細(xì)胞多樣性。在抗體發(fā)現(xiàn)早期階段獲得高質(zhì)量的陽性hits，避免“優(yōu)秀克隆”的丟失。

義翹神州單B細(xì)胞Beacon®平臺(tái)，自動(dòng)篩選上萬個(gè)漿細(xì)胞，將傳統(tǒng)雜交瘤技術(shù)需要1-2個(gè)月的篩選工作，縮短至僅需1天完成，并在1天內(nèi)可完成5項(xiàng)細(xì)胞功能檢測(cè)。整個(gè)篩選過程對(duì)細(xì)胞無損傷，最-大程度保證細(xì)胞的活性。

利用單B細(xì)胞Beacon®平臺(tái)篩選TNFR2成藥性抗體結(jié)果顯示，克隆M0166的結(jié)合活性和競(jìng)爭(zhēng)活性均高于對(duì)照抗體。

05義翹神州兔單抗技術(shù)服務(wù)

義翹神州依托于噬菌體展示、單B細(xì)胞流式分選和Beacon®三大技術(shù)，自主搭建的兔單抗開發(fā)平臺(tái)，提供從抗原設(shè)計(jì)、免疫到抗體純化的一站式兔單克隆抗體制備服務(wù)。兔單抗服務(wù)經(jīng)驗(yàn)豐富，已完成500多項(xiàng)CRO服務(wù)，成功率高于90%，單B細(xì)胞陽性率高于行業(yè)平均水平30-50%。義翹神州兔單抗服務(wù)可以直接獲得抗體序列，便于后續(xù)工程化改造，還提供ELISA、IHC、FACS、IF、WB、IP、Cell assay等多種抗體鑒定服務(wù)。

義翹神州單B細(xì)胞抗體平臺(tái)硬實(shí)力

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本文不屬于治療方案推薦，如需獲得治療方案指導(dǎo)，請(qǐng)前往正規(guī)醫(yī)院就診。