BC0150-50T/24S 土壤纖維素酶(S-CL)檢測試劑盒
具體成交價以合同協議為準
- 公司名稱 北京索萊寶科技有限公司
- 品牌 SOLARBIO/索萊寶
- 型號 BC0150-50T/24S
- 產地 北京
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/4/25 9:26:12
- 訪問次數 1562
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CAS | 無 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T/24S |
貨號 | BC0150 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,綜合 |
主要用途 | 土壤纖維素酶(S-CL)檢測 |
可見分光光度法
貨號:BC0150
規格:50T/24S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體10 mL×1瓶(自備) | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
S-CL主要來源于土壤微生物,S-CL催化農作物秸稈產生的葡萄糖是主要的碳源營養物質。本產品采用3,5-二硝基水楊酸法測定S-CL催化纖維素降解產生的還原糖的含量。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、30~50目篩、研缽、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干,過30~50目篩。
二、測定步驟
分光光度計預熱30min以上,調節波長至540nm,蒸餾水調零。
標準品準備:將標準品用蒸餾水稀釋至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1mg/mL。
標準品稀釋表:
序號 | 稀釋前濃度(mg/mL) | 標準液體積(µL) | 蒸餾水體積(µL) | 稀釋后濃度(mg/mL) |
1 | 10 | 100 | 900 | 1 |
2 | 1 | 160 | 40 | 0.8 |
3 | 1 | 120 | 80 | 0.6 |
4 | 1 | 80 | 120 | 0.4 |
5 | 1 | 40 | 160 | 0.2 |
6 | 1 | 20 | 180 | 0.1 |
4、操作表(在EP管中依次加入下列試劑)
對照管 | 測定管 | 標準管 | 空白管 | |
風干土樣(g) | 0.25 | 0.25 | - | - |
試劑一(μL) | 125 | 125 | - | - |
煮沸15min(蓋緊) | 振蕩混勻,室溫放置15min | - | - | |
試劑二(μL) | 250 | 250 | - | - |
試劑三(μL) | 1000 | 1000 | - | - |
蒸餾水(μL) | 250 | 250 | - | - |
振蕩混勻,40℃水浴糖化1h 后,煮沸15min(蓋緊,防止水分散失),10000rpm常溫離心10min,取上清得糖化液。 | ||||
糖化液(μL) | 50 | 50 | - | - |
標準液(μL) | - | - | 50 | - |
蒸餾水(μL) | - | - | - | 50 |
試劑四(μL) | 150 | 150 | 150 | 150 |
混勻, 沸水浴中煮沸顯色15min(蓋緊,防止水分散失),冷卻 | ||||
蒸餾水(μL) | 1050 | 1050 | 1050 | 1050 |
混勻,冷卻后,取1000μL至1mL玻璃比色皿,測定540nm下吸光值A,分別記為A對照管、A測定管、A標準管、A空白管。計算ΔA測定=A測定管-A對照管,ΔA標準=A標準管-A空白管。每個測定管設定一個對照管。空白管和標準曲線只需做1-2次。 |
1、標準曲線的建立:
以標準溶液濃度(y)為縱坐標,吸光度ΔA標準(x)為橫坐標建立標準曲線y=kx+b。根據標準曲線,將ΔA測定帶入公式中(x)計算樣本濃度y(mg/mL)。
2、S-CL酶活計算:
單位的定義:每天每g土樣中產生1mg葡萄糖定義為一個酶活力單位。
S-CL酶活(U/g 土樣)=y×V反總÷W÷T =156×y
T:反應時間,1h=1/24d;V反總:反應體系總體積,1.625mL;W:樣本質量,0.25g。
注意事項:
若樣本測定管吸光度過小(0.02),可延長反應時間,即40℃水浴糖化時間,最后計算時加以換算即可。
參考文獻:
Deng S P, Tabatabai M A. Cellulase activity of soils[J]. Soil Biology and Biochemistry, 1994, 26(10): 1347-1354.
Sinegani A A S, Sinegani M S. The effects of carbonates removal on adsorption, immobilization and activity of cellulase in a calcareous soil[J]. Geoderma, 2012, 173: 145-151.
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