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亮發光桿菌如何分離鑒定?

閱讀:684      發布時間:2017-10-13
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【方法】利用亮發光桿菌富集培養基分離喜樹種子內生放線菌,并根據菌落形態及 16S rRNA 基因序列同源性分析進行菌種鑒定;以及利用與病原微生物共培養方法檢測分離菌株的抗菌活性。

【結果】從上海交通大學校園的喜樹種子中共分離到 33株內生疑似放線菌,經基于 16S rRNA基因序列分析的分子鑒定,確定其中 21 株屬于鏈霉菌,1 株屬于擬諾卡氏菌,另有 3 株由于序列相似性低于 95%而無法分類;8 株因未能克隆 16S rRNA 基因序列而未確定分類。這 11 株疑似內生放線菌是否是新放線菌(種)類群,有待后續深入研究。初步的抗細菌、真菌活性檢測發現,分離到的內生放線菌中 42.42%以上對立枯絲核菌(Rhizoctonia solani Kühn)有很強的抑制菌核形成的作用,54.54%內生菌有較強抑制芽孢桿菌生長的作用。并且挑選其中具有代表性的菌株 Streptomyces sp. CXSZ1 進行代謝產物的分析,初步發現其代謝產物中含有抗細菌活性成分。

【結論】喜樹種子內生放線菌的分離、鑒定及生物活性物質分離鑒定的研究工作,一方面可以為揭示喜樹等高等植物種子內生菌的起源、演化等提供有價值的信息,同時也為新結構、新活性化合物發掘提供實驗材料。

植物內生菌長期生活于某種植物內部,因其*的生存環境,可能進化出與宿主植物類似的代謝途徑與產物。近年來,植物內生菌作為一種新的微生物資源,而成為天然產物發掘的熱點,并成功篩選到了紫杉醇、鬼臼毒素、長春堿等化合物產生菌。獲得特定生物活性物質產生菌,不僅為環保、可持續天然產物,及實現規模化提供了有利條件;同時,也為復雜天然產物生物合成途徑理論研究提供了更好的實驗材料。

喜樹為我國*珙桐科高大喬木,其次生代謝產物中的喜樹堿(Camptothecin,CPT)通過作用于拓撲異構酶 I (Topo I),而誘導細胞凋亡。喜樹堿及其衍生物已被廣泛應用于肝癌、胃癌、膀胱癌及白血病等的臨床治療。迄今對于喜樹內生菌的研究主要集中在內生亮發光桿菌,并且已經發現了能夠產喜樹堿的內生真菌;對喜樹的根、莖、葉等器官中的內生放線菌已有研究,但對喜樹種子內生放線菌的研究尚未見報道。
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亮發光桿菌

 

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