目錄:合肥恩派爾貿易有限公司>>Abnbio感受態細胞>>表達 感受態細胞>> ABG217-50TB1 感受態細胞
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50X100ul |
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貨號 | ABG217-50 | 應用領域 | 環保,食品/農產品,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 感受態細胞 |
基因型
F– ara Δ(lac-proAB) rpsL (StrR)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15]thi hsdR
簡要說明
TB1感受態細胞來源于JM83,是JM83hsdR型,只含有大腸桿菌RNA polymerase,缺少BL21(DE3)菌株的 T7 RNA polymerase,適合NEB公司的pMAL系列質粒原核蛋白表達(The pMAL vectors use the E. coliRNApolymerase),不能用于pET系列質粒的表達,具有lian霉素抗性。TB1感受態細胞由特殊工藝制作,經pUC19質粒檢測轉化效率高達108cfu/μg。
操作說明
1、取100μl冰上融化的TB1感受態細胞,加入目的質粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌2YT或LB培養基,混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。
注意事項
1、感受態細胞最好在冰上融化。
2. 混入質粒時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒可相應減少最終用于涂板的菌量。
4. 誘導時,IPTG濃度可選(0.1-2mM均可)。
5. 為獲得需要量的蛋白,最佳誘導時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優化。