目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>Abnbio感受態(tài)細(xì)胞>>表達(dá) 感受態(tài)細(xì)胞>> ABG217-50TB1 感受態(tài)細(xì)胞
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更新時(shí)間：2024-03-27 10:56:46瀏覽次數(shù)：316評(píng)價(jià)
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50X100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | ABG217-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,食品/農(nóng)產(chǎn)品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 感受態(tài)細(xì)胞 |
基因型
F– ara Δ(lac-proAB) rpsL (StrR)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15]thi hsdR
簡要說明
TB1感受態(tài)細(xì)胞來源于JM83，是JM83hsdR型，只含有大腸桿菌RNA polymerase，缺少BL21(DE3)菌株的 T7 RNA polymerase，適合NEB公司的pMAL系列質(zhì)粒原核蛋白表達(dá)(The pMAL vectors use the E. coliRNApolymerase)，不能用于pET系列質(zhì)粒的表達(dá)，具有l(wèi)ian霉素抗性。TB1感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率高達(dá)108cfu/μg。
操作說明
1、取100μl冰上融化的TB1感受態(tài)細(xì)胞，加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌2YT或LB培養(yǎng)基，混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)
1、感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。
2. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?？上鄳?yīng)減少最終用于涂板的菌量。
4. 誘導(dǎo)時(shí)，IPTG濃度可選（0.1-2mM均可）。
5. 為獲得需要量的蛋白，最佳誘導(dǎo)時(shí)間，溫度，IPTG濃度需實(shí)驗(yàn)者優(yōu)化。
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