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目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>Abnbio感受態(tài)細(xì)胞>>表達(dá) 感受態(tài)細(xì)胞>> ABG222-50JM109(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞

JM109(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞
  • JM109(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞
參考價 918
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
918
≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 Abnbio
  • 型號 ABG222-50
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 合肥市
屬性

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更新時間:2024-03-27 14:33:16瀏覽次數(shù):469評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50X100ul
貨號 ABG222-50 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,食品/農(nóng)產(chǎn)品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
主要用途 感受態(tài)細(xì)胞
JM109(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 保存條件:-80℃ 基因型endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk-,mk+)relA1supE44D(lac-proAB) [F? traD36 proAB laqI qZΔM15](DE3)

基因型

endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk-,mk+)relA1supE44D(lac-proAB) [F? traD36 proAB laqI qZΔM15](DE3)


簡要說明

JM109(DE3)菌株來源于JM109,用于高效表達(dá)克隆于含有噬菌體T7啟動子的表達(dá)載體(如pET系列)的基因。λ噬菌體DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶,該區(qū)整合于JM109的染色體上,所以稱為JM109(DE3)??赏瑫r表達(dá)T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,用于pET系列,pGEX,pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。JM109(DE3)菌株不可用于藍(lán)白斑篩選試驗。JM109(DE3)感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率高于108 cfu /μg DNA。


操作說明

1、JM109(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,待菌塊融化,加入目的DNA并用手撥EP管底混勻,冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。 

3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌2YT或LB培養(yǎng)基,混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。


注意事項

1、感受態(tài)細(xì)胞最好在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。

2. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少最終用于涂板的菌量。

3. 誘導(dǎo)時,IPTG濃度可選(0.1-2 mM均可)。

4. 為獲得需要量的蛋白,最佳誘導(dǎo)時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優(yōu)化。













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