目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> DNA 濃度測定試劑盒(Hoechst 33258 法)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100次 |
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貨號 | XY-D-1584 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | DNA Concentration Assay Kit (Hoechst 33258 Method) |
保存條件 | -20℃ | 有效期 | 6個月 |
產(chǎn)品簡介:
對 dsDNA 進行準(zhǔn)確定量是很多重要的分子生物學(xué)實驗的前提。不同的定量方法有不同的線性范圍和檢測靈敏度,對干擾的屏蔽能力也各不相同。其中, OD260 測定法操作最-簡單,但靈敏度只有 5 μg/mL,不能屏蔽單鏈 DNA、RNA 和核苷酸的干擾。為此本公司開發(fā)了基于 Hoechst 33258 熒光染料的 dsDNA 定量產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
1.即開即用,用戶不需要單獨摸索最佳條件。
2.操作簡單,只需要將 Hoechst 33258 工作液與待測樣品混合即可。
3.徹-底屏蔽 RNA 的干擾,同樣濃度 RNA 產(chǎn)生的熒光不超過 DNA 的 1%,尤其適用于直接用細胞裂解液測定 DNA 濃度(此時有大量RNA 存在)。
4.能部分屏蔽單鏈 DNA 的干擾。Hoechst 33258 熒光染料與單鏈 DNA 結(jié)合時發(fā)出的熒光并不會與單鏈DNA 濃度成比例。
5.需要激發(fā)波長為 365 nm,發(fā)射波長為 458 nm 的熒光儀。
6.可選用比色皿檢測模式,也可選用多孔板檢測模式。
7.靈敏度比 OD260 測定法高 500 倍,為 10 ng/mL。
8.線性范圍為 10 ng/mL-10 μg/mL(相當(dāng)于 10 pg/μL-10 ng/μL)。
9.Hoechst 33258 染料對dsDNA 具有高度選擇性,主要識別AT 區(qū)。
10.提供dsDNA 定量對照,用于制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。dsDNA 定量對照AT 含量為 59%。
11.本產(chǎn)品足夠 100 次 100 μL 體系的測定,每次用 10 μL 樣品。
12.DNA 濃度測定試劑盒(Hoechst 33258 法)只能用于科研。
產(chǎn)品參數(shù):
規(guī)格及成分
成分 | 規(guī)格 | 包裝 |
20×Hoechst 33258-DNA 結(jié)合液 | 10ML | 10 mL 本色瓶 |
dsDNA 定量對照,10 mg/mL | 1ML | 1.5 mL 本色管 |
Hoechst 33258 染液 | 10ML | 10 mL 棕塑瓶 |
使用手冊 | 1份 | 無 |
保存和運輸
低溫運輸,-20℃保存,有效期半年。
自備試劑
超純水,能檢測激發(fā)波長為 365 nm,發(fā)射波長為 458 nm 的熒光儀。
使用方法:
1.將 DNA 標(biāo)準(zhǔn)品用 Hoechst 33258-DNA 結(jié)合液稀釋成 1 mg/mL,此為工作液,放冰上待用。
2.打開儀器預(yù)熱 10-15 分鐘。
3.用超純水將 20×Hoechst 33258-DNA 結(jié)合液稀釋到 1×,用多少稀釋多少。
4.用 1×Hoechst 33258-DNA 結(jié)合液將本試劑盒提供的dsDNA 定量對照梯度稀釋成 1 mg/mL、100 μg/mL、10 μg/mL、1 μg/mL、100 ng/mL、10 ng/mL共六個濃度,各取 100 μL 到離心管中放常溫待用。
5.取 1×Hoechst 33258-DNA 結(jié)合液 100 μL 到離心管中作為空白對照。
6.對 N 個待測樣本,如果是待測 DNA 溶液,則取 10-100 μL 到離心管中,補 1×Hoechst 33258-DNA 結(jié)合液到總體積為 100 μL;如果是細胞裂解液,則稀釋細胞裂解液使其 SDS 的濃度不超過 0.02%。如果超過此濃度,將在下步會降低熒光讀數(shù)。
7.在上述 6+1+N 個離心管中各加 100 μL Hoechst 33258 染液,充分震蕩混合。
8.40℃放置 20 分鐘。
9.測定 458 nm 光吸收(激發(fā)波長為 365 nm)。
10.所有光吸收數(shù)值減去空白對照數(shù)值,然后根據(jù)此數(shù)值制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,再用 N 各樣本的數(shù)值從標(biāo)準(zhǔn)曲線中推出檢測管中樣本的 DNA 濃度,再根據(jù)稀釋倍數(shù)計算出稀釋前樣本中 DNA 的濃度。
選擇我們的DNA 濃度測定試劑盒(Hoechst 33258 法),就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護航!
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