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目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學試劑>>試劑盒>> DNA 片段加T試劑盒

DNA 片段加T試劑盒
  • DNA 片段加T試劑盒
參考價 450
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協議為準
450
≥1
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 烜雅生物
  • 型號
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2025-05-19 16:39:29瀏覽次數:75評價

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供貨周期 現貨 規格 50次
貨號 XY-D-1625 應用領域 化工,生物產業
主要用途 科研 英文名稱 /
保存條件 -20℃ 有效期 12個月
DNA 片段加T試劑盒適用于任何平末端的 DNA 片段,包括 Pfu DNA 聚合酶等高保真 DNA 聚合酶合成的 DNA 片段或限制性內切酶酶切回收得到的 DNA 片段。

產品簡介:

某些 DNA 聚合酶具有不依賴于模板的末端轉移酶活性,在只有 dTTP 存在的情況下,可以在平末端的 DNA 片段的兩個 3’端各加上一個 dT 尾巴。本產品就是利用此原理開放的加 T 試劑盒,主要用于制備 T 載體或在平末端的 DNA 片段上加上 1 個 T 尾巴。


產品特點:

1.簡單, 2X 加 T 預混合液中含有所需要的所有成分(包括酶),不需要單獨準備。

2.各成分優良用量經過優化,用戶不需要單獨調試。

3.適用于任何平末端的 DNA 片段,包括 Pfu DNA 聚合酶等高保真 DNA 聚合酶合成的 DNA 片段或限制性內切酶酶切回收得到的 DNA 片段。

4.加 T 后的載體可以作為 T 載體使用。


產品參數:

產品規格

成分規格包裝
2X 加 T 預混液1.25 mL2.0mL 本色管
使用手冊1 份

保存和運輸

DNA 片段加T試劑盒低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。

自備試劑

平末端 DNA 片段、平末端質粒 DNA、自備超純水。


使用方法:

一:反應前純化處理:

1.平末端 DNA 片段或平末端質粒 DNA 可以采取膠回收和酚/氯仿抽提法等常規方法純化,最后溶解在水或TE 中,終濃度以 0.1 ug/uL 為宜。必須注意的是, 用 Vent, Deep Vent, Pfu, Pwo 等具有 3 到 5 外切活性的 DNA 聚合酶擴增得到的 DNA 片段,必須經過徹-底的去除殘留的酶的處理過程(如酚/ 氯仿抽提或 Proteinase K 處理),否則它們將在加 T 反應時,將切除掉加上的 T 尾巴,干擾反應。

2.本產品的加尾酶在 DNA 的 3’末端的核苷酸為 T 時,加 T 效率更高,故如果有可能,最好滿足此要求。

二:加 T 反應

3.在干凈的0.5 mL或1.5 mL離心管中,分別加入回收的DNA 片段(0.2-2 ug)、 25 uL 2 X 加 T 緩沖液、最后補水到 50 uL,在 PCR 儀上 72℃保溫 2 小時。如果用金屬浴或水浴,必須加 50uL 石蠟油,否則水分在反應過程中將蒸發, 影響加尾效率。

4.加 T 反應后,加尾酶將與 DNA 末端緊密結合,所以必須酚/氯仿抽提去除。如果使用 Proteinase K 處理后再用酚/氯仿抽提效果會更好。得到的 DNA溶于適量水和 TE 中后即可用于后續連接反應。由于加一個 T 不會改變 DNA

片段的瓊脂糖電泳速度,故不能通過跑電泳檢測加尾效果。

選擇我們的DNA 片段加T試劑盒,就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護航!

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