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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50次 |
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貨號 | XY-D-1630 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Liquid Sample Protein Purification Kit |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 12個月 |
產品簡介:
本產品專門用于對液體樣品進行蛋白提取濃縮、脫鹽、脫去垢劑、脫還原劑等。
產品特點:
1.適用于各種液體樣品,包括蛋白溶液、胞漿提取液、胞核提取液、細胞或微生物培養基上清液、血液、尿液、腦脊液等。也適于原代或傳代細胞懸液。
2.靈敏,對一般蛋白樣品,最-低濃度可達 1 μg/mL;對含 SDS 的樣品,最-低濃度為5 μg/mL。
3.蛋白回收率 95-100%,遠高于經典的丙酮或三氯醋酸沉淀法,且可有效去除樣品中的脂質,不影響后續 SDS-PAGE 和Western Blot 等生物實驗
4.得到的蛋白質可用于后續的 SDS-PAGE、免疫沉淀和質譜分析等實驗。但蛋白已經變性,沒有活性。
5.能有效去除液體樣品中的鹽(1 M)、還原劑(1%巰基乙醇或 DTT)、去垢劑(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40)和油脂等。
6.操作方便迅速,只需要混勻后離心,不需要其他儀器。
7.產品穩定,可室溫長期放置。
8.液體樣品蛋白純化回收試劑盒只能用于科研。
產品參數:
產品規格
成分 | 規格 | 包裝 |
溶液A | 0.5 mL | 0.5 mL 本色管 |
溶液B | 1 mL | 5 mL 棕玻瓶 |
溶液C | 50 mL | 60 mL 本色瓶 |
使用手冊 | 1 份 | 1 份 |
保存和運輸
常溫運輸和保存,有效期一年。
自備試劑
1 M Tris-HCl,pH 8.8
使用方法:
使用方法一(用于不含 SDS 的液體樣品,但樣品蛋白濃度不能低于 1 μg/mL)
1.將 100 μL 需要液體蛋白樣品轉移到一個自備的 1.5 mL 塑料離心管中。
2.加入 10 μL 溶液 A,渦旋激烈震蕩 10-30 秒混勻。
3.冰上放置 15 分鐘。
4.加入 10 μL 溶液 B,輕輕混勻。
5.冰上放置 60 分鐘。
6. 4℃ 12,000-15,000×g 離心 10 分鐘。
7.小心移棄上清液,保留蛋白沉淀。
8.加入 1 mL 冰浴的溶液 C,震蕩混勻后 4℃ 12,000-15,000×g 離心 15 分鐘。
9.小心移棄上清液,保留蛋白沉淀。
10.短暫離心,小心移棄殘留上清液后,將有蛋白沉淀的離心管敞開放置在冰上,空氣晾干。一般需要 10 分鐘左右。
11.樣品放 4℃保存或立即電泳檢測??芍苯佑?1×SDS-PAGE 上樣液或其他電泳緩沖液溶解蛋白沉淀,取適量上樣。如果藍色的溴酚藍染料變黃,則說明有殘留酸性物質污染,必須加少量自備的 1 M Tris-HCl(pH 8.8)緩沖液,直到顏色變成藍色為止,否則將影響電泳結果。
使用方法二(用于含 SDS 的液體蛋白樣品,但樣品蛋白濃度不能低于 5 μg/mL)
1.將 200 μL 液體蛋白樣品轉移到一個自備的 1.5 mL 塑料離心管中。
2.加入 8 μL 溶液 B,渦旋激烈震蕩 10-30 秒混勻。
3.冰上放置 30 分鐘或-20℃放置 15 分鐘(過夜放置更好)。
4. 4℃ 12,000-15,000×g 離心 15 分鐘。
5.小心移棄上清液,保留蛋白沉淀。
6.加入 1 mL 冰浴的溶液 C,震蕩混勻后 4℃ 12,000-15,000×g 離心 15 分鐘。
7.小心移棄上清液,保留蛋白沉淀。
8.短暫離心,小心移棄殘留上清液后,將有蛋白沉淀的離心管敞開放置在冰上,空氣晾干。一般需要 10 分鐘左右。
9.樣品放 4℃保存或立即電泳檢測??芍苯佑?1×SDS-PAGE 上樣液或其他電泳緩沖液溶解蛋白沉淀,取適量上樣。如果藍色的溴酚藍染料變黃,則說明有殘留酸性物質污染,必須加少量自備的 1 M Tris-HCl(pH 8.8)緩沖液,直到顏色變成藍色為止,否則將影響電泳結果。
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