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產(chǎn)品簡介：

SDS-PAGE 電泳不僅可用于檢測蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量，而且也是分離純化蛋白質(zhì)的重要工具之一。隨著蛋白質(zhì)技術(shù)的微量化，可以從 PAGE 凝膠中回收蛋白質(zhì)以用于制備抗體、用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)、用于氨基酸組分分析或末端序列測定等。本產(chǎn)品就是專門針對此用途開發(fā)的 PAGE 凝膠蛋白回收試劑盒。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.簡單，不需要購買復(fù)雜而昂貴的儀器設(shè)備（如電洗脫儀）。

2.適用于變性膠（SDS-PAGE）、非變性膠（如 Blue PAGE）和其他任何 PAGE 凝膠。

3.蛋白的回收率一般在 50-90%之間（跟蛋白質(zhì)大小，洗脫時(shí)間相關(guān)）。

4.回收的蛋白可用于后續(xù)多種實(shí)驗(yàn)，包括 2-D 電泳、質(zhì)譜測序、抗體制備等。

5.本產(chǎn)品足夠 50 次微量蛋白純化。

6.PAGE 凝膠蛋白回收試劑盒（過柱法）只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

保存和運(yùn)輸

常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。

自備試劑

根據(jù)后續(xù)使用決定。

使用方法：

1.按常規(guī)方法進(jìn)行變性 SDS-PAGE、尿素-PAGE，Tricine-SDS-PAGE 電泳，或非變性蛋白電泳，如 Bule PAGE。由于 PAGE 凝膠固定和染色后，蛋白回收效果很差，所以建議把蛋白樣品同時(shí)上樣到多個(gè)孔中并電泳。

2.電泳結(jié)束后，在對 PAGE 凝膠進(jìn)行固定和染色時(shí)，切下其中一個(gè)樣孔所對應(yīng)的膠條進(jìn)行固定和染色，其余的不固定不染色。

3.將出現(xiàn)蛋白條帶后的膠條放回到在整個(gè) PAGE 膠中此膠條切除前的位置， 通過膠條上的蛋白條帶來找到在未染色膠上該蛋白預(yù)計(jì)出現(xiàn)的區(qū)域，并切下此區(qū)域的 PAGE 凝膠（含未固定和為染色的目的蛋白）進(jìn)行回收。

4.去除含目的蛋白的膠條的多余凝膠，否則它們會影響蛋白回收效率。

5.將修整后的 PAGE 膠條轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的 1.5 mL 塑料離心管中，放-80℃過夜。

6.同時(shí)將一個(gè)非常干凈的研缽和研磨杵放-20℃過夜。

7.次日，將凝膠倒入用研缽中，用研磨杵研磨成粉。

8.將凝膠粉轉(zhuǎn)移到一個(gè)吸附柱中。

9.加入 100 μL 過柱法 PAGE 凝膠蛋白回收試劑溶液 A，放置 10 分鐘。期間，凝膠將膨脹，繼續(xù)補(bǔ)加，直到凝膠不再膨脹并且凝膠上層覆蓋 1-2 mm 厚的液體。

10.室溫 12,000×g 離心 3 分鐘，收集穿透液，并轉(zhuǎn)移到新的離心管中，標(biāo)注為穿透液 1。

11.再加入過柱法PAGE 凝膠蛋白回收試劑溶液A，使得凝膠上層覆蓋1-2 mm厚的液體。

12.室溫 12,000×g 離心 3 分鐘，收集穿透液，并轉(zhuǎn)移到新的離心管中，標(biāo)注為穿透液 2。

13.測定穿透液中的蛋白濃度或長度，可以直接進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，也可以放-20℃長期保存。

選擇我們的PAGE 凝膠蛋白回收試劑盒（過柱法），就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！