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產品簡介：

本產品是單堿基延伸（Single Base Extension，SBE）試劑盒，用于測定核酸中特定位置的堿基，常跟質譜等能分辨一個堿基差異的后續研究結合使用。在進行 SBE 反應中，SBE 引物與靶核酸樣品雜交。在聚合酶和雙脫氧核苷酸的作用下， SBE 引物的 3’末端以靶分子為模板延伸一個堿基。如果該靶位點有突變，則延伸一個堿基，因此它們的分子量將有一個堿基的差異，這個分子量差異可以通過質譜等方法檢測出來。SBE 技術的示意圖如下：

產品特點：

1.即開即用，不用自行優化實驗條件。

2.選擇專一的 SBE 專用 DNA 聚合酶，專一性強，非特異添加率低。

3.提供 4 種 ddNTP，方便用戶檢測所需的任何位點；ddATP、ddCTP、ddTTP 及 ddGTP 的分子量分別為：541.13、517.10、532.11 及 557.13。

4.跟后續的質譜（如 MALDI-TOF）等檢測方法兼容。

5.本產品足夠 100 次單堿基延伸。

6.單堿基延伸試劑盒只可用于科研。

產品參數：

產品規格

成份編號規格包裝

ddATP Solution，1mM100μL0.5 mL 白蓋管

ddTTP Solution，1mM100μL0.5 mL 本色管

ddGTP Solution，1mM100μL0.5 mL 藍蓋管

ddCTP Solution，1mM100μL0.5 mL 紫蓋管

SBE 專用 DNA 聚合酶100μL0.5 mL 紅蓋管

10×SBE 緩沖液100μL0.5 mL 綠蓋管

SBE 終止液（EDTA 0.2mM）100μL0.5 mL 黃蓋管

使用手冊1 份無

保存和運輸

低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

SBE 模板，SBE 引物。

使用方法：

1.在 0.2 mL 微量離心管中按下表設置一個 10 μL 體系的 SBE 反應（如果需要標記更多探針，請增加標記體積而不要增加探針 DNA 的濃度）：

成份用量

自備 SBE 模板25 μM

自備 SBE 引物

（如果 3’端第一個共價鍵使用硫代 Phosphorothioate修飾，則修飾引物比常規引物專一性更強）10 μM

四種 ddNTP 選一種1 μL

10×SBE 緩沖液1 μL

補超純水到 9 ?L-

SBE 專用 DNA 聚合酶1 μL

合計10 μL

2.37℃反應 3 小時。一定要使用熱蓋已經開啟的 PCR 儀進行保溫。

3.加入 1 ?L SBE 終止液（EDTA 0.2mM），吹打混勻。

4.95℃反應 5 分鐘滅活酶。

5.去除鹽離子和蛋白之后，可以用于后續的 MALDI-TOF。本產品不含相關試劑。

選擇我們的單堿基延伸試劑盒，就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！