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產品簡介：

本產品是真菌基因組 DNA 柱式提取試劑盒，可以用于真菌基因組 DNA 的快速提取。真菌 DNA 提取是一個難題，一是因為真菌有菌絲體、孢子等多種完-全不同的結構形態，二是因為其細胞壁一般都很厚，比較難以破碎。本產品專門用于從真菌孢子和液體培養的真菌細胞中提取 DNA。

產品特點：

1.即開即用，提供包括玻璃珠、離心吸附柱在內的所有試劑和耗材。

2.既可以采取液氮研磨法破裂真菌，也可用玻璃珠法破碎真菌，兩種方法均屬于物理方法，遠比基于蝸牛酶或破壁酶的溫和化學破壁法重復性好，也不容易帶入外援真菌 DNA（注：文獻報道蝸牛酶或破壁酶中常常有外源真菌 DNA 污染，用于提取真菌 DNA 往往會造成污染）。

3.本方法提取一個樣品只需要 30 分鐘，方便、快速和高效。

4.一次可以處理 5 mL 的過夜真菌培養物，所得的基因組 DNA OD260/OD280 一般都在 1.8 左右，長度一般在 20 kb 左右，每毫升菌液的 DNA 產率一般在 1-3 μg。可以直接用于PCR 和酶切等后續試驗。

5.不會發生離心柱堵塞現象。

6.本產品足夠 50 次微量純化。

7.真菌 DNA-提取試劑盒(過柱法) 只能用于科研。

產品參數：

產品規格

成分規格包裝

真菌 DNA 提取溶液 A25 mL30 mL本色瓶

真菌 DNA 提取溶液 B25 mL30 mL棕玻瓶

真菌 DNA 提取溶液 C75 mL125 mL本色瓶

離心吸附柱50套塑料袋

通用洗柱液50 mL60 mL本色瓶

DNA 洗脫液（基因組純化專用）10 mL10 mL 本色瓶

酸洗玻璃珠(直徑 400 μm-600 μm)25 g30 mL 本色瓶

使用手冊1份無

保存和運輸

常溫運輸及保存，保存期為一年。

自備試劑

無菌水。

使用方法：

1.收集菌體或孢子:

1.1、 對菌液：取 3-5 mL 過夜培養的真菌菌液(OD600 一般在 1 以上)到干凈的塑料離心管中，12000 × g 離心 2 分鐘棄上清留菌體沉淀。

1.2、 對菌落：用接種針在在培養基上刮取盡可能多的真菌菌落（約 50 mg）， 轉移到裝有 1 mL 自備無菌水的干凈的塑料離心管中，洗滌下接種環上的

菌體。12000 × g 離心 2 分鐘棄上清留菌體沉淀。

1.3、 對孢子材料，一般取 0.1 g 左右，直接加入到塑料離心管中，然后進入下一步操作。

2.在上述真菌材料中加入自備的無菌水 1 mL，振蕩半分鐘后 12000 × g 離心 2

分鐘棄上清留菌體沉淀。此步用于洗滌菌體。

3.裂解真菌：

3.1、 液氮研磨：在研缽中液氮研磨上述真菌材料成粉，然后轉移到干凈的離心管中，在離心管中加入 500 μL 真菌 DNA 提取溶液 A，常溫渦旋震蕩 3分鐘。

3.2、 玻璃珠破碎法：在沒有液氮的條件下，采用此法。在菌體沉淀中加入 500

μL 真菌DNA 提取溶液A 和 0.5 克的酸洗玻璃珠，常溫渦旋震蕩 10 分鐘。

4.在離心管中加入 500 μL 真菌 DNA 提取溶液 B，渦旋震蕩 3 分鐘，12000 × g離心 2 分鐘，將透明的上清液全部轉移到一個 5 mL 的干凈的塑料離心管中。不要取下層的液體。

5.在上清中加入 3 倍體積的真菌 DNA 提取溶液 C，顛倒數次混勻后，分三次上離心吸附柱，每次上柱后均先室溫放置 2 分鐘，然后 12000 × g 離心 1 分鐘，倒掉穿透液，再第二次上柱，重復上面的操作，直到掛柱步驟完成。

6.在離心吸附柱中加入 500 μL 通用洗柱液，12000 × g 離心 1 分鐘，倒掉穿透液。此步可以洗滌掉雜質。

7.重復上步操作一次。

8.12000 × g 空柱離心 1 分鐘。

9.加入 50-100 μL DNA 洗脫液（基因組提取專用），室溫放置 1 分鐘以上，12000

× g 離心 1 分鐘，穿透液即為真菌 DNA 樣品。

10.為了得到更多的 DNA 樣品，可以重復上步操作 1-2 次。

11.所得 DNA 即可立即使用或放冰箱長期保存。

選擇我們的真菌 DNA-提取試劑盒(過柱法) ，就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！