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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50次 |
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貨號 | XY-D-1692 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | SP6 in vitro Transcription Kit |
保存條件 | -20℃ | 有效期 | 12個月 |
產品簡介:
本試劑盒是基于SP6 RNA 聚合酶的 RNA 體外轉錄試劑盒,它利用含有 SP6 啟動子的模版 DNA,以 NTP 為底物,從 SP6 啟動子下游開始合成與模版 DNA 中一條鏈互補的 RNA,簡單快速獲得大量的 RNA 分子。
產品特點:
1.即開即用,只需提供含 SP6 啟動子的 DNA 模板即可進行體外轉錄實驗。
2.單溶液預配液,減少加樣次數,避免了操作誤差,增加了可重復性。
3.模版 DNA 可以是線性化的質粒 DNA,也可以是 PCR 擴增產物。
4.可以合成的 RNA 的最佳長度在 20 nt 到 2000 nt 之間。
5.產品配方經過精心優化,每 ug DNA 模版可以合成 2-6 ug RNA。
6.得到的 RNA 可以用于 RNA 結構研究、核酶生物化學、體外翻譯等實驗。
7.SP6體外轉錄試劑盒足夠 50 次 20uL 的體外轉錄實驗。本產品只能用于科研。
產品參數:
成份規格包裝材料
T7-SP6 體外轉錄預配液,2×0.5 mL0.5 mL 本色蓋
SP6 RNA 聚合酶-RI 混合液50 μL0.5 mL 紅 蓋
RNase-free 水1 mL1.5 mL 黃 蓋
使用手冊1 份無
保存和運輸
低溫運輸,-20℃保存, 有效期一年。
自備試劑
如果需要去除轉錄產物中的 DNA 模板,則需要自備 RNase-free DNase、Tris 飽和酚、氯仿、微量核酸沉淀劑、RNase-free 75%乙醇(均可從本公司另購)
疑難解答:
沒有 RNA 產物。最常見原因是模板有 RNase 污染,可用純化的 RNA 跟模板DNA 一起保溫,再檢測RNA 是否降解。還可以增加RNase Inhibitor 用量,本試劑盒緩沖液和酶混合液中有 RNase inhibitor,如果模板 RNase 污染嚴重,可能需要用戶補加RNase inhibitor。
2、RNA 產量低。最常見的原因是 DNA 模板。在轉錄序列的第一個和第二個堿基最好都是 G,在前 14 個堿基內避免有U 存在。
3、RNA 長度比預期的短。可能是模板序列中有SP6 RNA 聚合酶的終止序列。可以改用 SP6 體外轉錄試劑盒(啟動子也必須改成 SP6 啟動子)。
4、RNA 長度比預計的長。SP6 RNA 聚合酶跟 Taq DNA 聚合酶一樣,有不依賴于模板的加尾功能,最多有一半的 RNA 可以帶一個或兩個堿基的尾巴。如果 RNA 長度比預計的長很多,使用的模板又是質粒DNA,則可能是線性化不徹-底。
5、5’單磷酸還是三磷酸。如果使用 GTP,則得到的 RNA 是三磷酸,體外轉錄時如果保溫時間太長(如 12 小時),則有 50%的三磷酸會變成單磷酸。如果在轉錄體系中加入 GMP,則 SP6 RNA 聚合酶將優先使用GMP,所得 RNA 產物中5’端是單磷酸的比例將大大增加。
6、如何得到帶帽 RNA?需加入帶帽 NTP 類似物即可,本公司提供 5 種供選擇。
選擇我們的SP6體外轉錄試劑盒,就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護航!