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目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> 改良Lowry法蛋白定量試劑盒

改良Lowry法蛋白定量試劑盒
  • 改良Lowry法蛋白定量試劑盒
參考價(jià) 790
訂貨量 ≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
790
≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 烜雅生物
  • 型號(hào)
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時(shí)間:2025-05-19 19:22:04瀏覽次數(shù):74評(píng)價(jià)

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更多產(chǎn)品
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1000次
貨號(hào) XY-D-1708 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 英文名稱 Modified Lowry Protein Assay Kit
保存條件 常溫 有效期 12個(gè)月
改良Lowry法蛋白定量試劑盒即開(kāi)即用,不需要單獨(dú)購(gòu)買每個(gè)成分再配制。本產(chǎn)品只能用于科研。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

Folin 酚(福林酚)試劑(磷鉬酸和磷鎢酸混合物)跟蛋白質(zhì)中含酚氨基酸(色-氨酸和酪-氨酸)發(fā)生顏色反應(yīng),可用于測(cè)定蛋白質(zhì)濃度,但靈敏度較低。Lowry 在此基礎(chǔ)上加入 Biuret(雙縮脲)反應(yīng)步驟,即先在堿性條件下使蛋白質(zhì)和 Cu+形成復(fù)合物,再使其與 Folin 酚試劑發(fā)生顯色反應(yīng),產(chǎn)物在 750nm 檢測(cè)。Lowry 法使不含酚的蛋白質(zhì)也能被檢測(cè)出來(lái),靈敏度是單獨(dú)使用 Folin 酚的 10 倍左右,是雙縮脲反應(yīng)的 200 倍,因此成為早期檢測(cè)蛋白濃度的主要方法。Lowry 法檢測(cè)原理圖如下:


改良Lowry法蛋白定量試劑盒

產(chǎn)品特點(diǎn):

1.即開(kāi)即用,不需要單獨(dú)購(gòu)買每個(gè)成分再配制。

2.能抵抗部分干擾物(如一定濃度 SDS 或其他去污劑)的干擾。

3.檢測(cè)線性范圍廣,在 2-100 ?g,檢測(cè)上限比經(jīng)典 Lowry 法高 30%-40%。

4.改良Lowry法蛋白定量試劑盒只能用于科研。


產(chǎn)品參數(shù):

成分 規(guī)格包裝

改良Lowry 法蛋白定量溶液A1 208 mL250 mL 本色瓶

改良Lowry 法蛋白定量溶液A216 mL30 mL 本色瓶

改良Lowry 法蛋白定量溶液A3 16 mL30 mL 本色瓶

改良 Lowry 法蛋白定量溶液 B 80 mL125 mL 本色瓶

改良 Lowry 法蛋白定量溶液 C 80 mL125 mL 本色瓶

福林酚 10 mL10 mL 棕色瓶

BSA 標(biāo)準(zhǔn)品,2 mg/mL 1 mL1.5 mL 本色管

使用手冊(cè) 1 份無(wú)

運(yùn)輸及保存

常溫運(yùn)輸和保存,但 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品需要-20℃保存,有效期 12 個(gè)月。

自備試劑

去離子水,蛋白樣品,樣品緩沖液。


使用方法:

一、工作液的制備

1.制備溶液A:將16 mL改良Lowry 法蛋白定量溶液A2 和16 mL改良Lowry法蛋白定量溶液 A3 加入到裝改良 Lowry 法蛋白定量溶液 A1 的塑料瓶中, 混合均勻得到 240 mL 改良 Lowry 法蛋白定量溶液溶液 A。

2.制備改良 Lowry 法蛋白定量工作液:將改良 Lowry 法蛋白定量溶液 A、改良 Lowry 法蛋白定量溶液 B 和改良 Lowry 法蛋白定量溶液 C 按 3:1:1 的體積比混合得到改良 Lowry 法蛋白定量工作液。此工作液可以室溫放置2-3 周,所以最好用多少配多少。如果發(fā)現(xiàn)改良 Lowry 法蛋白定量溶液 B 或改良 Lowry 法蛋白定量溶液 C 有沉淀,需 37℃溶解并搖勻后再使用。

3.制備福林酚工作液:在裝有 10 mL 福林酚的棕色塑料瓶中加入 90 mL 去離子水,搖晃混勻待用。此工作液在避光條件下可以放置 6 個(gè)月。

二、試管法

4.先用去離子水將 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品,2 mg/mL 稀釋到 50 ?g/mL,然后在標(biāo)記的試管中加入下列成分(單位:?L)。注意:每個(gè)樣品最好做三個(gè)稀釋度,

每個(gè)稀釋度最好設(shè)置三次重復(fù),陰性對(duì)照和標(biāo)準(zhǔn)品也最好做三次重復(fù)。

標(biāo)準(zhǔn)品(每個(gè)做三次重復(fù),此處只列出一個(gè))

編號(hào)BSA 標(biāo)準(zhǔn),50 ?g/mL水總體積

陰性對(duì)照00200

10200200

225175200

350150200

4100100200

515050200

62000200

樣品(以 1 個(gè)樣品、3 個(gè)稀釋度為例,

每個(gè)稀釋度三個(gè)重復(fù),此處只列出一個(gè))

編號(hào)樣品總體積

1200(稀釋度 1)200

陰性對(duì)照 1200(用稀釋度 1 稀釋的溶解蛋白樣

品的緩沖液)200

2200(稀釋度 2)200

陰性對(duì)照 2200(用稀釋度 2 稀釋的溶解蛋白樣200

 

品的緩沖液)

3200(稀釋度 3)200

陰性對(duì)照 3200(用稀釋度 3 稀釋的溶解蛋白樣

品的緩沖液)

200

5.每管中加入 200 ?L 改良 Lowry 法蛋白定量工作液,振蕩混勻后室溫反應(yīng)10 分鐘。

6.每管中加入 100 ?L 福林酚工作液,振蕩混勻后室溫反應(yīng) 30 分鐘。

7.用容量為 0.5 mL、光徑為 1 cm 的玻璃比色杯或聚苯乙烯比色杯測(cè)定750nm 的光吸收。測(cè)定時(shí),先空白(即陰性對(duì)照)后樣品,測(cè)定樣品和 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),先低濃度后高濃度。測(cè)定未知樣品前需要將杯子清洗干凈,必要  時(shí)可以用甲醇清洗吸附到比色杯壁上的染料。

8.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品三個(gè)重復(fù)的平均值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后根據(jù)未知樣品的光吸收從  標(biāo)準(zhǔn)曲線中查得其對(duì)應(yīng)的濃度。

三、96 微孔板法

9.同上,只是反應(yīng)用 96 微孔板設(shè)置,用酶標(biāo)測(cè)試儀 750 nm 測(cè)定光吸收。四、樣品中干擾物質(zhì)的去除

10.如果樣品中有干擾 Lowry 法蛋白定量的物質(zhì),可用自備試劑按下法去除:

用水將樣品調(diào)到體積為 200 ?L,加入 20 ?L 的 0.15%去氧膽酸鈉,混勻,室溫放置 10 分鐘。加入 20 ?L 的 72%的 TCA,室溫放置 5 分鐘。3000 g 離心 15 分鐘,小心去除上清。用 200 ?L 水溶解蛋白沉淀后以用于 Lowry 法測(cè)定。


選擇我們的改良Lowry法蛋白定量試劑盒,就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案,為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航!

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