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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本產(chǎn)品利用 Taq DNA polymerase 的不依賴于模板的末端轉(zhuǎn)移酶活性，在只有 dATP 存在的情況下，在平末端的 DNA 片段加上一個(gè) dA 尾巴，使平末端片段也能被 T 載體克隆。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.簡(jiǎn)單，2×加 A MasterMix 中含有所需要的所有成分，不需要單獨(dú)準(zhǔn)備。

2.適用于任何平末端的 DNA 片段，包括 Pfu DNA polymerase 等酶合成的 DNA 片段。

3.產(chǎn)物可以直接用于與 T 載體的連接。

4.本產(chǎn)品足夠 50 次加 A 反應(yīng)。

5.DNA 片段加 A 試劑盒只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

成份規(guī)格包裝

2×加 A MasterMix1 mL2mL 本色管

使用手冊(cè)1 份無(wú)

運(yùn)輸及保存

低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

PCR 片段、超純水

使用方法：

一：反應(yīng)前純化處理：

用 Vent, Deep Vent, Pfu, Pwo 等具有 3 到 5 外切活性的 DNA 聚合酶擴(kuò)增得到的 DNA 片段，必須經(jīng)過(guò)徹-底的去除殘留的酶的處理過(guò)程（如酚/氯仿抽提或 Proteinase K 處理），否則它們將在加 A 反應(yīng)時(shí)，切除掉加上的 A 尾巴，干擾反應(yīng)。可以采取膠回收和酚/氯仿抽提法等常規(guī)方法純化，最后溶解在水或TE 中，終濃度以 0.1 ug/uL 為宜。

二：加 A 反應(yīng)

在干凈的 0.5 mL 或 1.5 mL 離心管中，分別加入回收的 DNA 片段(0.2-2 ug)，25 uL 2×加 A MasterMix，補(bǔ)水到 50 uL 后 72℃保溫 2 小時(shí)

三：反應(yīng)后處理

加 A 反應(yīng)后，Taq DNA polymerase 將與 DNA 末端緊密結(jié)合，所以必須酚/氯仿抽提去除。如果使用 Proteinase K 處理后再用酚/氯仿抽提效果會(huì)更好。得到的 DNA 溶于適量水和 TE 中后即可用于 T 載體的連接反應(yīng)。

選擇我們的DNA 片段加 A 試劑盒，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！