目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學試劑>>試劑盒>> 血液 RNA 純化試劑盒(過柱法)
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50次 |
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貨號 | XY-D-1824 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | / |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 1年 |
產品簡介:
本產品專門從動物全血樣品中快速提取總 RNA。
產品特點:
1.直接使用新鮮的或冷凍的抗凝全血樣品,不需裂解紅細胞等預處理步驟, 整個提取過程只需要十分鐘左右。
2.可以全在室溫下進行。
3.產量和純度高。OD260/280 一般在 2.0 左右,產率一般為 2-5 μg/mL人血,可以直接用于 RT-PCR 和 Northern 雜交等研究。
4.每次微量提取的最大樣品處理量可以達到 1.5 mL,高于大多數同類產品。
5.與常用的抗凝劑(包括肝素,EDTA,檸檬酸鈉,草酸鈉)兼容。
6.血液 RNA 純化試劑盒(過柱法)只能用于科研。
產品參數:
成份規格包裝
血液 RNA 純化溶液A50 mL60 mL 本色瓶
血液 RNA 純化溶液 B15 mL15 mL 棕玻瓶
血液 RNA 純化溶液 C50 mL60 mL 本色瓶
離心吸附柱50 套塑料袋
通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶
RNA 洗脫液10 mL10 mL 本色瓶
使用手冊1 份無
運輸及保存
常溫運輸和保存,有效期一年。
自備試劑
氯仿。
使用方法:
1.將 0.2-1.5 mL 新鮮或解凍后的抗凝全血加入到 1.5 mL 塑料離心管中。
2.14000 g 室溫離心 3 分鐘,棄上清(血漿)。如果此時血液細胞沉淀體積大于 0.2 mL, 則需要減少血液的使用量,具體減少量需根據具體情況決定,因為各個個體(尤其是患者)血液中白細胞數目差別很大。
3.將 1 mL 血液 RNA 純化溶液 A 加入到血液細胞沉淀中,用移液槍充分吹打沉淀使細胞裂解。
4.將 0.3 mL 的血液 RNA 純化溶液 B 加入到離心管中,劇烈震蕩 30 秒。
5.和 0.2 mL 自備氯仿加入到離心管中,劇烈震蕩 30 秒。
6.14000 g 室溫離心 3 分鐘,將上清液(為無色或淺紅色,約 0.5-0.9 mL)轉移到另一干凈離心管中。注意:轉移的液體不要超過 0.7 mL,否則下一步不能加入等體積的血液 RNA 純化溶液 C。為防止污染,最好留 100
uL 左右的上清液不取。下層有機相一般呈深紅色,中間層為白色,含有
DNA,蛋白質和其他細胞破碎物,避免觸及或吸取。
7.加入等體積的血液RNA 純化溶液 C,充分顛倒混勻。
8.分兩次將溶液轉移到離心吸附柱中,每次轉移后 14000 g 室溫離心半分鐘,棄穿透液。
9.加 0.7 mL 通用洗柱液,室溫離心半分鐘,棄穿透液。
10.如果有必要,可以再加 0.3 mL 通用洗柱液,室溫離心半分鐘,棄穿透液。注意:增加此步可以進一步提高 RNA 的純度。
11.室溫 14000 g 離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的通用洗柱液會影響 RNA 的后續反應。
12.將離心吸附柱轉移到一個自備的 RNase-free 的收集管中,加入 50 uL RNA 洗脫液,室溫放置 1-2 分鐘。
13.14000 g 室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為 RNA 樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
14.電泳檢測 RNA 完整性:如果需要做 Northern 雜交,強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行 RNA 電泳,因為非變性膠不能分離所有的 RNA 分子
(BioTechniques,28:414,2000)。
15.在 NanoDrop 上測濃度和純度。
16.立即用于后續實驗,或放-80℃保存。
選擇我們的血液 RNA 純化試劑盒(過柱法),就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護航!