試劑簡介

Acti-stain 670 Phalloidin是由西安強(qiáng)化生物科技開發(fā)的紅色熒光探針。

其核心成分 鬼筆環(huán)肽（Phalloidin） 是一種從毒蘑菇鬼筆鵝膏（Amanitaphalloides）中提取的七肽毒素，能特異性結(jié)合聚合態(tài)肌動(dòng)蛋白（F-actin），但不結(jié)合單體肌動(dòng)蛋白（G-actin）。

該探針主要用于細(xì)胞骨架的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)研究，適用于固定細(xì)胞和組織切片的熒光染色。

實(shí)驗(yàn)方法與操作步驟

樣品準(zhǔn)備

<固定細(xì)胞>：使用3.7%多聚甲醛固定細(xì)胞（避免甲醇破壞F-actin結(jié)構(gòu)），0.5% Triton X-100通透5分鐘。

<活細(xì)胞>：需結(jié)合低毒性透膜劑（如SIR-Actin試劑盒）。

染色液配制

取14 µM原液，用甲醇溶解后稀釋至100 nM工作液（PBS或細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋）。

孵育與清洗

每張載玻片滴加200 µl工作液，室溫避光孵育30分鐘。

PBS清洗3次（每次30秒），去除未結(jié)合探針。

復(fù)染與成像

<核染色>：可選DAPI（100 nM，30秒）。

<封片>：抗淬滅封片劑封固，4℃避光保存24小時(shí)內(nèi)成像

規(guī)格信息

外觀：淺藍(lán)色固體

純度：>99%

分子量：2011

保存：凍干粉4℃干燥保存1年；儲(chǔ)存液-20℃避光保存半年；

重溶方法：使用前簡單離心使得產(chǎn)品都降至管底，加入500µl 甲醇充分溶解后配置成14µM儲(chǔ)存液。建議按照10×50µl分裝，-20℃避光保存，穩(wěn)定保存6個(gè)月。

運(yùn)輸方式：冰袋運(yùn)輸

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技